QuickEasyᵀᴹ Real Time PCR Kit-Taqman
Opisi
2× QuickEasyTMPravi PCR Mix-Taqman koji obezbeđuje QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman kit je nova generacija master mix sistema dizajnirana za reakciju amplifikacije PCR u realnom vremenu koristeći specifične fluorescentne sonde.Njegova jezgra Foregene HS Taq DNK polimeraze je bazirana na modifikaciji antitela, koja se koristi u sprezi sa Foregene dodatno optimizovanim PCR sistemom, ima veću specifičnost i efikasnost amplifikacije.U poređenju sa običnom PCR mešavinom, ima jaču sposobnost amplifikacije i nižu stopu neslaganja.Može se koristiti u fluorescentnoj kvantitativnoj PCR reakciji kako bi se smanjila nespecifična amplifikacija i poboljšala tačnost PCR-a.Može uvelike poboljšati specifičnost proizvoda i osjetljivost na reakciju.Istovremeno, ROX je obezbeđen kao interna referentna boja.
QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman komplet ima širok opseg primjene na količinu šablona i može dobiti dobru standardnu krivu u različitim kvantitativnim regijama i može precizno kvantificirati i otkriti ciljne gene sa dobrom ponovljivošću i visokim povjerenjem.
Specifikacije
200 priprema,500 priprema,1000 priprema,2000 Preps
Komponente kompleta
QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman(20μlsistem) | ||||
Sadržaj kompleta | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 Preps | 500 Preps | 1000 Preps | 2000 Preps | |
2×BrzoLakoTM Pravi PCR Mix-Taqman | 1 mL×2 | 1,7 mL×3 | 1,7 mL×6 | 1,7 mL×12 |
20×ROX referentna boja | 200μL | 0,5 mL | 1 mL | 1 mL×2 |
ddH bez DNaze2O | 1,7 mL | 1,7 mL×2 | 10 mL | 20 mL |
IFU | 1komad | 1komad | 1komad | 1komad |
Karakteristike&prednosti
■ Jedinstveni sistem PCR optimizacije čini 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman je kompatibilniji.
■ Hot-start Foregene HS Taq Polymerase ima veću efikasnost amplifikacije, veću osjetljivost amplifikacije i veću specifičnost amplifikacije.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix -Taqman koristi jedinstveni sistem optimizovan od strane Foregene za poboljšanje osetljivosti i specifičnosti detekcije sonde specifične za sekvencu, koja se može koristiti za genotipizaciju i određivanje varijacije broja kopija i dobijanje tačnih rezultata.
■ Ovaj proizvod dolazi sa ROX internom referentnom bojom, koja se može koristiti za eliminaciju signalne pozadine i greške signala između bunara, što je pogodno za kupce za upotrebu u različitim vrstama kvantitativnih PCR instrumenata.
Aplikacija kompleta
■ Fluorescentni kvantitativni PCR za šablonsku kvantitativnu analizu;
■ Ckonvencionalna PCR amplifikacija;
■ Može se koristiti za detekciju alela.
Skladištenje i rok trajanja
Komplet treba čuvati na -20°C u mraku;ako se često koristi, može se kratko čuvati i na 4°C (iskoristi se u roku od 10 dana).
Principi dizajna prajmera za PCR u realnom vremenu
Forward Primer i Reverse Primer
Za PCR u realnom vremenu, dizajn prajmera je veoma važan.Prajmeri se odnose na specifičnost i efikasnost PCR amplifikacije, a mogu se dizajnirati prema sljedećim principima:
Dužina prajmera: 18-30bp.
GC sadržaj: 40-60%.
Tm vrijednost: Softver za dizajn prajmera, kao što je Primer 5, može dati Tm vrijednost prajmera.Vrijednosti Tm uzvodnih i nizvodnih prajmera trebaju biti što je moguće bliže.Može se koristiti i formula za proračun Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Prilikom izvođenja PCR-a, temperatura ispod Tm vrijednosti prajmera od 5 °C općenito se bira kao temperatura žarenja (odgovarajuće povećanje temperature žarenja može povećati specifičnost PCR reakcije).
Prajmeri i PCR proizvodi:
Dizajn prajmera PCR amplifikacije dužine proizvoda je poželjno 100-150bp.
Dizajnerske prajmere u sekundarnoj strukturnoj oblasti šablona treba izbegavati što je više moguće.
Izbjegavajte stvaranje 2 ili više komplementarnih baza između 3′ krajeva uzvodnih i nizvodnih prajmera.
Prajmer 3′ terminalna baza ne može biti prisutna sa 3 dodatna uzastopna G ili C.
Sami prajmeri ne mogu imati komplementarne strukture, inače će se formirati struktura ukosnice koja utiče na PCR amplifikaciju.
ATCG bi trebao biti raspoređen što je moguće ravnomjernije u sekvenci prajmera, a 3′ terminalnu bazu treba izbjegavati kao T.
Dodatak 1: Cell Direct RT-qPCR Kit komponentni paket dodataka
1.Rastvor za lizu ćelija
| |||
Komponente kompleta (sistem za lizu sa 24 jažice / bunar) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
PartI | Buffer CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
PartII | DNK Eraser | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT Mix
| |
Komponente kompleta (20 μl reakcijski sistem) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
ddH bez RNaze2O | 1,7 ml × 2 |
| ||
Komponente kompleta (20 μl reakcijski sistem) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
50× ROX referentna boja | 40 μl | 200 μl |
ddH bez RNaze2O | 1,7 ml | 10 ml |