Animal Tissue Direct PCR kit-UNG (bez alata za uzorkovanje) Protokol
Opisi
Ovaj komplet koristi jedinstveni sistem pufera za lizu za brzo oslobađanje genomske DNK iz uzoraka životinjskog tkiva za PCR reakcije, tako da je posebno pogodan za genetsko testiranje velikih razmjera.
Proces oslobađanja genomske DNK iz pufera za lizu je završen u roku od 10-30 minuta na 65°C.Nisu potrebni nikakvi drugi procesi poput uklanjanja proteina i RNK, a oslobođena DNK u tragovima može se koristiti kao šablon za PCR reakciju.
2×PCR EasyTMMix (UNG) koristi dUTP umjesto dTTP na osnovu 2×PCR EasyTMPomiješajte i dodaje UNG enzim (Uracil-N-glikozilazu) koji može istovremeno razgraditi šablon koji sadrži dUTP.Prije PCR reakcije, enzim UNG se koristi za razgradnju PCR proizvoda koji sadrži uracil.Enzim UNG neće imati nikakav uticaj na šablon koji ne sadrži uracil, čime se obezbeđuje specifičnost i tačnost amplifikacije i sprečava mogućnost kontaminacije PCR proizvodima tokom velikog genetskog testiranja.
D-Taq DNK polimeraza je DNK polimeraza koju je Foregene posebno razvio za direktne PCR reakcije.D-Taq DNK polimeraza ima jaku toleranciju na razne inhibitore PCR reakcije i može efikasno pojačati tragove DNK u različitim složenim reakcionim sistemima, a brzina amplifikacije može doseći 2Kb/min, što je posebno pogodno za direktnu PCR reakciju.
Komponente kompleta
dio I | Buffer AL |
Foregene Protease | |
6× pufer za učitavanje DNK | |
Dio II | 2×PCR EasyTMmix (UNG) |
Karakteristike&prednosti
■Bez dugotrajnog i skupog pročišćavanja DNK
■ Potreba za uzorkom je mala, može se testirati samo 5 mg životinjskog tkiva.
■ Nije potreban poseban tretman kao što je mljevenje i drobljenje, a operacija je jednostavna.
■ Optimizovani PCR sistem čini da PCR ima veću specifičnost i jaču toleranciju na inhibitore PCR reakcije.
■ PCR sistem protiv zagađenja 2×PCR EasyTMMix (UNG) efikasno eliminiše zagađenje uzrokovano PCR proizvodima i osigurava specifičnost i tačnost amplifikacije.
Parametri kompleta
Primjena: razna životinjska tkiva.
DNK oslobođen iz lize uzorka: koristi se samo kao PCR šablon.
Komplet se može koristiti u sljedeće svrhe: identifikacija transgenoze, genotipizacija životinja, itd.
Radni tok
Skladištenje i rok trajanja
Dio I ovog kompleta treba čuvati na 2-8℃.
Reagens Pufer AL može se čuvati 12 meseci u suvim uslovima;može se pohraniti na 2-8℃za duže skladištenje.
Reagens Foregene Protease ima jedinstvenu formulu.Da biste osigurali njegovu aktivnost i stabilnost, pohranite ga na 4℃na 12 mjeseci.
Reagens 6×Bafer za učitavanje DNK može se pohraniti na 4℃ili -20℃dugo vremena.
Dio II ovog kompleta treba čuvati na -20℃.
Reagens 2×PCR EasyTMMix(UNG), ako se često koristi, može se čuvati i na 4℃za kratkotrajno skladištenje (iskoristiti u roku od 10 dana).