Lnc-RT Heroᵀᴹ I (sa gDNazom) (super premiks za sintezu prvog lanca cDNK iz lncRNA)
Specifikacije
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (sa gDNazom) je sistem reverzne transkripcije posebno razvijen za lncRNA za brzo uklanjanje kontaminacije genomske DNK.5×gDNase Mix može brzo ukloniti preostali genom u RNK na 42°C u trajanju od 2 minuta, efikasno izbjegavajući interferenciju genoma na qPCR rezultate.
5×L-RT HeroTM Mix sadrži Foregene LncRNA reverznu transkriptazu posebno razvijenu od strane Foregene, koja je nova vrsta reverzne transkriptaze posebno za lncRNA i druge dugačke RNA kompleksne šablone, sa jačim RNA afinitetom i većom efikasnošću reverznog snimanja.Optimizirani sistem čini brzinu reverzne transkripcije bržom i može lako transkribovati RNK šablone sa visokim sadržajem GC i složenom sekundarnom strukturom.Sinteza prvog lanca cDNK može se završiti na 42°C za 15 minuta.
Komponente kompleta
| 5× gDNase Mix |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| ddH2O bez RNaze |
| Instrukcije |
Karakteristike&prednosti
■Efikasna sposobnost uklanjanja gDNK, koja može ukloniti gDNK u šablonu u roku od 2 minute.
■ Može efikasno obrnuti transkripciju lncRNA.Kada se proizvod reverzne transkripcije podvrgne qPCR-u, vrijednost Ct je niža od one kod konvencionalnog sistema reverzne transkripcije.
■ Efikasan sistem reverzne transkripcije, potrebno je samo 15 minuta da se završi sinteza prvog lanca cDNK.
■ Složeni šabloni: šabloni sa visokim sadržajem GC-a i složenom sekundarnom strukturom se takođe mogu obrnuti sa velikom efikasnošću.
■ Sistem reverzne transkripcije visoke osjetljivosti, šabloni na nivou pg također mogu dobiti visokokvalitetni cDNK.
■ Sistem reverzne transkripcije ima visoku termičku stabilnost, optimalna temperatura reakcije je 42℃, i još uvijek ima dobre performanse reverzne transkripcije na 50℃.
Aplikacija kompleta
lncRNA relativna kvantitativna analiza.
lncRNA apsolutna kvantitativna analiza.
Može brzo i precizno analizirati RNK u tragovima kao što je RNK virus.
Reverzna transkripcija RNA šablona sa visokim sadržajem GC ili složenom sekundarnom strukturom.
Radni tok
Skladištenje i rok trajanja
Komplet treba čuvati na -20°C. Proizvod čuvajte u frižideru sa konstantnom temperaturom na -20°C odmah nakon prijema.Ako su uslovi skladištenja odgovarajući, proizvod neće pogoršati performanse tokom perioda važenja od 1 godine.
Vodič za analizu problema
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-specifično pojačanje
1. Nerazuman dizajn prajmera
Preporuka: Dizajnirati prajmere prema principima projektovanja prajmera.
2. Ostaci genoma.
Preporuka: Uvjerite se da je temperatura reakcije prvog koraka uklanjanja gDNK 42°C, a vrijeme reakcije se također može produžiti na 5 minuta.
Nema pojačanja signala pomoću RT-qPCR
1. RNK se razgrađuje.
Preporuka: Materijal za ekstrakciju RNK treba da bude što svežiji, a da se koristi visokokvalitetna i čista RNK.
2. RNK sadrži inhibitore.
Preporuka: Inhibitori reverzne transkripcije uglavnom uključuju SDS, gvanidinske soli, EDTA, itd. Preporučuje se ispiranje RNA precipitata sa 70% etanola da bi se uklonili inhibitori.
3. Problemi dizajna prajmera.
Preporuka: Prema principu dizajna prajmera, redizajnirati prajmere za pregled.
Ciljna traka se pojavljuje u praznoj kontroli
1. Kontaminacija operativnih alata ili reagensa.
Preporuka: Sve reagense ili opremu za eksperiment treba autoklavirati.Budite pažljivi i nježni prilikom rukovanja kako biste spriječili da se uzorci DNK usišu u pipetu ili izlije iz epruvete za centrifugu.
2. Do kontaminacije je došlo tokom pripreme PCR reakcijskog sistema.
Preporuka: Poduzmite potrebne mjere opreza prilikom rukovanja, kao što su: nošenje rukavica od lateksa, korištenje vrhova filtera.Koristite Real Time PCR Mix u sistemu zaštićenom od kontaminacije.
3. Prajmeri su degradirani.
Prijedlog: Koristite SDS-PAGE elektroforezu da otkrijete da li su prajmeri degradirani i zamijenite ih novim prajmerima za eksperimente detekcije fluorescencije.
Uputstvo za upotrebu:
