• facebook
  • linkedin
  • youtube
English
page_banner

Foreasy HS Taq DNK polimeraza

Istaknuta slika HS Taq DNA polimeraze Foreasy
  • Foreasy HS Taq DNK polimeraza

Opis kompleta:

◮Visoka specifičnost: Enzim sa visokom aktivnošću pri pokretanju.

◮Brzo pojačanje: 10 sek/kb.

◮Visoka prilagodljivost šablona: može se koristiti za efikasno pojačanje HighGCvrijednostirazne DNK šablone koje se teško umnožavaju.

◮Jaka vjernost: vjernost je 6 putaof obični Taq enzim.

inozemna snaga


Detalji o proizvodu

Oznake proizvoda

FAQ

Opis

Foreasy HS Taq DNK polimeraza je novi Taq enzim izražen u Escherichia coli inženjerskim bakterijama tehnologijom rekombinacije gena.Nakon što se enzim tretira posebnim postupkom, on'Njegova aktivnost se inhibira prije termičke aktivacije, čime se inhibira nespecifično pojačanje uzrokovano nespecifičnim žarenjem prajmera ili dimera prajmera u uslovima niske temperature.Ovaj proizvod je pogodan za visoko specifičnu PCR Reaction, Višestruki x PCR , visok sadržaj GC ( > 60%) ,sasekundarna strukturaili drugojak pozadinski genomicsamplifikacija i genom velikih razmjeraicsdetekcija pojačanja.Enzim ima aktivnost 5' → 3' DNK polimeraze i 5' → 3' egzonukleaznu aktivnost, ali nema aktivnost 3' → 5' egzonukleaze.

Komponente kompleta

Komponenta IM-01021 IM-01022 IM-01023
Foreasy HS Taq DNK polimeraza (5 U/μL)  5000 U (1 mL)  50 KU (10 mL)  500 KU (100 mL)
2× Taq Reaction Buffer  25mL ×5  250 mL ×5  500 mL × 25

Karakteristike&prednosti

- Visoka specifičnost: Enzim sa visokom aktivnošću pri pokretanju.

- Brzo pojačanje: 10 sec/kb.

- Visoka prilagodljivost šablona: može se koristiti za efikasno pojačanje HighGCvrijednostirazne DNK šablone koje se teško umnožavaju.

- Jaka vjernost: vjernost je 6 putaof obični Taq enzim.

Aplikacija kompleta

- Različiti PCR/qPCR sistem i direktni PCR sistem

- PCR amplificirani DNK fragment

- DNK oznaka

- DNK sekvenciranje

- PCR plus A rep

Definicija aktivnosti

1U : Količina enzima potrebna za ugradnju 10 nmolDNKu materiju netopivu u kiselini koristeći aktiviranu DNK sperme lososa kao šablon / prajmer, 74 °C, 30 minuta.

Reaction Condition

Temperatura Vrijeme reakcije Vrijeme ciklusa
37°C 5 min 1
94°C 5 min 1
94°C 10 sek  40
60°C 10 sek

Bilješka:Za sisteme od 10 µL i 20 µL, dodajte jednaku količinu mineralnog ulja ako termocikler nema poklopac za grijanje.

Uslovi PCR reakcije variraju u zavisnosti od strukturnih uslova šablona, ​​prajmera i slično.U specifičnoj operaciji, potrebno je dizajnirati optimalne reakcione uslove, uključujući temperaturu žarenja, vreme ekstenzije, itd., u skladu sa specifičnim uslovima kao što su tip šablona, ​​veličina ciljnog fragmenta, bazna sekvenca amplificiranog fragmenta, te GC sadržaj i dužina prajmera.

Skladištenje

-20 ± 5 °C tokom 2 godine ili na -80 °C za dugotrajno skladištenje.

  • Prethodno:
  • Sljedeći:

    • Nema pojačanja signala

    1.Taq DNK polimeraza u kompletu gubi svoju aktivnost zbog nepravilnog skladištenja ili isteka kompleta.
    Preporuka: Potvrdite uslove skladištenja kompleta;ponovo dodajte odgovarajuću količinu Taq DNK polimeraze u PCR sistem ili kupite novi komplet za PCR u realnom vremenu za povezane eksperimente.

    2. Postoji mnogo inhibitora Taq DNK polimeraze u DNK šablonu.
    Prijedlog: Pročistite šablon ili smanjite količinu korištenog šablona.

    3. Koncentracija Mg2+ nije prikladna.
    Preporuka: Koncentracija Mg2+ u 2× Real PCR mješavini koju pružamo je 3,5 mM.Međutim, za neke posebne prajmere i šablone, koncentracija Mg2+ može biti veća.Stoga možete direktno dodati MgCl2 kako biste optimizirali koncentraciju Mg2+.Preporučuje se povećanje Mg2+ za 0,5mM svaki put radi optimizacije.

    4. Uslovi PCR amplifikacije nisu prikladni, a sekvenca prajmera ili koncentracija je neodgovarajuća.
    Prijedlog: potvrdite ispravnost sekvence prajmera i prajmer nije degradiran;ako signal pojačanja nije dobar, pokušajte sniziti temperaturu žarenja i na odgovarajući način prilagoditi koncentraciju prajmera.

    5. Količina šablona je premala ili prevelika.
    Preporuka: Izvršite razblaživanje gradijentom linearizacije šablona i izaberite koncentraciju šablona sa najboljim PCR efektom za PCR eksperiment u realnom vremenu.

    NTC ima previsoku vrijednost fluorescencije

    1. Kontaminacija reagensom uzrokovana tokom rada.
    Preporuka: Zamijenite novim reagensima za PCR eksperimente u realnom vremenu.

    2. Do kontaminacije je došlo tokom pripreme PCR reakcijskog sistema.
    Preporuka: Poduzmite potrebne zaštitne mjere tokom rada, kao što su: nošenje rukavica od lateksa, korištenje vrha pipete sa filterom itd.

    3. Prajmeri su degradirani, a degradacija prajmera će uzrokovati nespecifično pojačanje.
    Prijedlog: Koristite SDS-PAGE elektroforezu da otkrijete da li su prajmeri degradirani i zamijenite ih novim prajmerima za PCR eksperimente u realnom vremenu.

    Dimer prajmera ili nespecifična amplifikacija

    1. Koncentracija Mg2+ nije prikladna.
    Preporuka: Koncentracija Mg2+ 2× Real PCR EasyTM mješavine koju nudimo je 3,5 mM.Međutim, za neke posebne prajmere i šablone, koncentracija Mg2+ može biti veća.Stoga možete direktno dodati MgCl2 kako biste optimizirali koncentraciju Mg2+.Preporučuje se povećanje Mg2+ za 0,5mM svaki put radi optimizacije.

    2. Temperatura PCR žarenja je preniska.
    Prijedlog: Svaki put povećajte temperaturu PCR žarenja za 1℃ ili 2℃.

    3. PCR proizvod je predugačak.
    Preporuka: Dužina PCR proizvoda u realnom vremenu treba da bude između 100-150bp, ne više od 500bp.

    4. Prajmeri su degradirani, a degradacija prajmera će dovesti do pojave specifične amplifikacije.
    Prijedlog: Koristite SDS-PAGE elektroforezu da otkrijete da li su prajmeri degradirani i zamijenite ih novim prajmerima za PCR eksperimente u realnom vremenu.

    5. PCR sistem je neispravan ili je sistem premali.
    Prijedlog: PCR reakcijski sistem je premali, što će uzrokovati smanjenje tačnosti detekcije.Najbolje je koristiti sistem reakcije koji preporučuje kvantitativni PCR instrument za ponovno izvođenje PCR eksperimenta u realnom vremenu.

    Slaba ponovljivost kvantitativnih vrijednosti

    1. Instrument je neispravan.
    Prijedlog: Može postojati greške između svake PCR rupe na instrumentu, što rezultira lošom ponovljivošću tokom upravljanja temperaturom ili detekcije.Molimo provjerite prema uputama odgovarajućeg instrumenta.

    2. Čistoća uzorka nije dobra.
    Preporuka: Nečisti uzorci će dovesti do loše ponovljivosti eksperimenta, što uključuje čistoću šablona i prajmera.Najbolje je ponovo pročistiti šablon, a prajmeri se najbolje pročišćavaju pomoću SDS-PAGE.

    3. Vrijeme pripreme i skladištenja PCR sistema je predugo.
    Preporuka: Koristite PCR sistem u realnom vremenu za PCR eksperiment odmah nakon pripreme i ne ostavljajte ga predugo po strani.

    4. Uslovi PCR amplifikacije nisu prikladni, a sekvenca prajmera ili koncentracija je neodgovarajuća.
    Prijedlog: potvrdite ispravnost sekvence prajmera i prajmer nije degradiran;ako signal pojačanja nije dobar, pokušajte sniziti temperaturu žarenja i na odgovarajući način prilagoditi koncentraciju prajmera.

    5. PCR sistem je neispravan ili je sistem premali.
    Prijedlog: PCR reakcijski sistem je premali, što će uzrokovati smanjenje tačnosti detekcije.Najbolje je koristiti sistem reakcije koji preporučuje kvantitativni PCR instrument za ponovno izvođenje PCR eksperimenta u realnom vremenu.

    Napišite svoju poruku ovdje i pošaljite nam je

    PovezanoProizvodi

    Pritisnite enter za pretragu ili ESC da zatvorite