• facebook
  • linkedin
  • youtube
page_banner

PCR u realnom vremenu Easyᵀᴹ-Taqman

Opis kompleta:

Jednostavno—2× PCR miks za smanjenje eksperimentalne greške i vremena rada

Specifično—optimizirani pufer i Taq enzim s vrućim startom mogu spriječiti nespecifično pojačavanje i formiranje dimera prajmera

Visoka osjetljivost—može otkriti male kopije šablona

Dobra svestranost—kompatibilna sa većinom kvantitativnih PCR instrumenata u realnom vremenu

inozemna snaga


Detalji o proizvodu

Oznake proizvoda

FAQ

Opisi kompleta

2X Real PCR EasyTMMix-Taqman koji obezbeđuje Real Time PCR EasyTM-Taqman komplet je novi premiks sistem koji koristi specifične fluorescentne sonde za reakcije PCR amplifikacije u realnom vremenu, koje mogu uveliko poboljšati specifičnost proizvoda i osjetljivost reakcije.ROX se isporučuje kao boja za internu kontrolu.

2X Real PCR EasyTMMix-Taqman sadrži Foregene jedinstvenu Taq DNK polimerazu sa vrućim startom.U poređenju sa običnim Taq enzimima, ima prednosti visoke efikasnosti amplifikacije, jake specifične sposobnosti amplifikacije i niske stope neusklađenosti.Može smanjiti nespecifično pojačanje i poboljšati tačnost PCR-a.

Specifikacije

PCR u realnom vremenu jednostavnoTM-Taqman

Sastav kompleta (20μl sistem)

QP-01021

QP-01022

QP-01023

QP-01024

200T

500T

1000T

2000T

Pravi PCRLakoTMMix-Taqman

1 ml ×2

1.7 ml ×3

1.7 ml ×6

1.7 ml ×12

20×ROX referentna boja

200 μl

0.5ml

1 ml

1 ml × 2

ddH bez DNaze2O

1,7 ml

1.7 ml ×2

10 ml

20 ml

Instruction

1

1

1

1

Karakteristike&prednosti

■ Jednostavno—2X PCR mešavina za smanjenje eksperimentalne greške i vreme rada

■ Specifično—optimizirani pufer i Taq enzim s vrućim startom mogu spriječiti nespecifično pojačavanje i formiranje dimera prajmera

■ Visoka osjetljivost—može otkriti male kopije šablona

■ Dobra svestranost—kompatibilna sa većinom kvantitativnih PCR instrumenata u realnom vremenu

Aplikacija kompleta

qPCR analiza

Radni tok

RT PCR-Taqman
RT PCR-Taqman grafika

Graphic

Skladištenje i rok trajanja

Ovaj komplet treba čuvati dalje od svjetlosti i treba ga čuvati na -20℃.Ako se često koristi, može se čuvati i na 4℃ u kratkom vremenskom periodu (10 dana).


  • Prethodno:
  • Sljedeći:

  • Nema pojačanja signala

    1.Taq DNK polimeraza u kompletu gubi svoju aktivnost zbog nepravilnog skladištenja ili isteka kompleta.
    Preporuka: Potvrdite uslove skladištenja kompleta;ponovo dodajte odgovarajuću količinu Taq DNK polimeraze u PCR sistem ili kupite novi komplet za PCR u realnom vremenu za povezane eksperimente.

    2. Postoji mnogo inhibitora Taq DNK polimeraze u DNK šablonu.
    Prijedlog: Pročistite šablon ili smanjite količinu korištenog šablona.

    3. Koncentracija Mg2+ nije prikladna.
    Preporuka: Koncentracija Mg2+ u 2× Real PCR mješavini koju pružamo je 3,5 mM.Međutim, za neke posebne prajmere i šablone, koncentracija Mg2+ može biti veća.Stoga možete direktno dodati MgCl2 kako biste optimizirali koncentraciju Mg2+.Preporučuje se povećanje Mg2+ za 0,5mM svaki put radi optimizacije.

    4. Uslovi PCR amplifikacije nisu prikladni, a sekvenca prajmera ili koncentracija je neodgovarajuća.
    Prijedlog: potvrdite ispravnost sekvence prajmera i prajmer nije degradiran;ako signal pojačanja nije dobar, pokušajte sniziti temperaturu žarenja i na odgovarajući način prilagoditi koncentraciju prajmera.

    5. Količina šablona je premala ili prevelika.
    Preporuka: Izvršite razblaživanje gradijentom linearizacije šablona i izaberite koncentraciju šablona sa najboljim PCR efektom za PCR eksperiment u realnom vremenu.

    NTC ima previsoku vrijednost fluorescencije

    1. Kontaminacija reagensom uzrokovana tokom rada.
    Preporuka: Zamijenite novim reagensima za PCR eksperimente u realnom vremenu.

    2. Do kontaminacije je došlo tokom pripreme PCR reakcijskog sistema.
    Preporuka: Poduzmite potrebne zaštitne mjere tokom rada, kao što su: nošenje rukavica od lateksa, korištenje vrha pipete sa filterom itd.

    3. Prajmeri su degradirani, a degradacija prajmera će uzrokovati nespecifično pojačanje.
    Prijedlog: Koristite SDS-PAGE elektroforezu da otkrijete da li su prajmeri degradirani i zamijenite ih novim prajmerima za PCR eksperimente u realnom vremenu.

    Dimer prajmera ili nespecifična amplifikacija

    1. Koncentracija Mg2+ nije prikladna.
    Preporuka: Koncentracija Mg2+ 2× Real PCR EasyTM mješavine koju nudimo je 3,5 mM.Međutim, za neke posebne prajmere i šablone, koncentracija Mg2+ može biti veća.Stoga možete direktno dodati MgCl2 kako biste optimizirali koncentraciju Mg2+.Preporučuje se povećanje Mg2+ za 0,5mM svaki put radi optimizacije.

    2. Temperatura PCR žarenja je preniska.
    Prijedlog: Svaki put povećajte temperaturu PCR žarenja za 1℃ ili 2℃.

    3. PCR proizvod je predugačak.
    Preporuka: Dužina PCR proizvoda u realnom vremenu treba da bude između 100-150bp, ne više od 500bp.

    4. Prajmeri su degradirani, a degradacija prajmera će dovesti do pojave specifične amplifikacije.
    Prijedlog: Koristite SDS-PAGE elektroforezu da otkrijete da li su prajmeri degradirani i zamijenite ih novim prajmerima za PCR eksperimente u realnom vremenu.

    5. PCR sistem je neispravan ili je sistem premali.
    Prijedlog: PCR reakcijski sistem je premali, što će uzrokovati smanjenje tačnosti detekcije.Najbolje je koristiti sistem reakcije koji preporučuje kvantitativni PCR instrument za ponovno izvođenje PCR eksperimenta u realnom vremenu.

    Slaba ponovljivost kvantitativnih vrijednosti

    1. Instrument je neispravan.
    Prijedlog: Može postojati greške između svake PCR rupe na instrumentu, što rezultira lošom ponovljivošću tokom upravljanja temperaturom ili detekcije.Molimo provjerite prema uputama odgovarajućeg instrumenta.

    2. Čistoća uzorka nije dobra.
    Preporuka: Nečisti uzorci će dovesti do loše ponovljivosti eksperimenta, što uključuje čistoću šablona i prajmera.Najbolje je ponovo pročistiti šablon, a prajmeri se najbolje pročišćavaju pomoću SDS-PAGE.

    3. Vrijeme pripreme i skladištenja PCR sistema je predugo.
    Preporuka: Koristite PCR sistem u realnom vremenu za PCR eksperiment odmah nakon pripreme i ne ostavljajte ga predugo po strani.

    4. Uslovi PCR amplifikacije nisu prikladni, a sekvenca prajmera ili koncentracija je neodgovarajuća.
    Prijedlog: potvrdite ispravnost sekvence prajmera i prajmer nije degradiran;ako signal pojačanja nije dobar, pokušajte sniziti temperaturu žarenja i na odgovarajući način prilagoditi koncentraciju prajmera.

    5. PCR sistem je neispravan ili je sistem premali.
    Prijedlog: PCR reakcijski sistem je premali, što će uzrokovati smanjenje tačnosti detekcije.Najbolje je koristiti sistem reakcije koji preporučuje kvantitativni PCR instrument za ponovno izvođenje PCR eksperimenta u realnom vremenu.

    Napišite svoju poruku ovdje i pošaljite nam je