Profesionalna kineska praktična i brza DNK/Rna sonda u jednom koraku Rt-Qpcr komplet
Naša firma ima za cilj da posluje vjerno, služeći svim našim kupcima, i dosljedno radi u novoj tehnologiji i novoj mašini za profesionalnu kinesku praktičnu i brzu DNK/Rna sondu u jednom koraku Rt-Qpcr Kit, Naša firma funkcioniše po principu procedure „zasnovanog na integritetu, kreirana saradnja, orijentisana na ljude, saradnja na dobitku“.Nadamo se da bismo mogli imati ugodnu romantičnu vezu sa poslovnim čovjekom iz cijelog okruženja.
Naša firma ima za cilj da posluje vjerno, služeći svim našim kupcima i dosljedno radi u novoj tehnologiji i novim mašinama zaKina Taq DNK polimeraza i Qpcr, Naše poslovne aktivnosti i procesi su dizajnirani da osiguraju našim kupcima pristup najširem spektru proizvoda i rješenja sa najkraćim rokovima isporuke.Ovo dostignuće je omogućeno zahvaljujući našem visokostručnom i iskusnom timu.Tražimo ljude koji žele rasti s nama širom svijeta i izdvojiti se iz gomile.Sada imamo ljude koji prihvataju sutra, imaju viziju, vole da protežu svoje umove i idu daleko dalje od onoga što su mislili da je ostvarivo.
Opisi kompleta
2X Real PCR EasyTMMix-Taqman koji obezbeđuje Real Time PCR EasyTM-Taqman komplet je novi premiks sistem koji koristi specifične fluorescentne sonde za reakcije PCR amplifikacije u realnom vremenu, koje mogu uveliko poboljšati specifičnost proizvoda i osjetljivost reakcije.ROX se isporučuje kao boja za internu kontrolu.
2X Real PCR EasyTMMix-Taqman sadrži Foregene jedinstvenu Taq DNK polimerazu sa vrućim startom.U poređenju sa običnim Taq enzimima, ima prednosti visoke efikasnosti amplifikacije, jake specifične sposobnosti amplifikacije i niske stope neusklađenosti.Može smanjiti nespecifično pojačanje i poboljšati tačnost PCR-a.
Specifikacije
PCR u realnom vremenu jednostavnoTM-Taqman | ||||
Sastav kompleta (20μl sistem) | QP-01021 | QP-01022 | QP-01023 | QP-01024 |
200T | 500T | 1000T | 2000T | |
2× Real PCR EasyTMMix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 3 | 1,7 ml × 6 | 1,7 ml × 12 |
20× ROX referentna boja | 200 μl | 0,5 ml | 1 ml | 1 ml × 2 |
ddH bez DNaze2O | 1,7 ml | 1,7 ml × 2 | 10 ml | 20 ml |
Uputstvo | 1 | 1 | 1 | 1 |
Karakteristike&prednosti
■ Jednostavno—2X PCR mešavina za smanjenje eksperimentalne greške i vreme rada
■ Specifično—optimizirani pufer i Taq enzim s vrućim startom mogu spriječiti nespecifično pojačavanje i formiranje dimera prajmera
■ Visoka osjetljivost—može otkriti male kopije šablona
■ Dobra svestranost—kompatibilna sa većinom kvantitativnih PCR instrumenata u realnom vremenu
Aplikacija kompleta
qPCR analiza
Radni tok
Graphic
Skladištenje i rok trajanja
Ovaj komplet treba čuvati dalje od svjetlosti i treba ga čuvati na -20℃.Ako se često koristi, može se čuvati i na 4℃ u kratkom vremenskom periodu (10 dana).
Naša firma ima za cilj da posluje vjerno, služeći svim našim kupcima, i dosljedno radi u novoj tehnologiji i novoj mašini za profesionalnu kinesku praktičnu i brzu DNK/Rna sondu u jednom koraku Rt-Qpcr Kit, Naša firma funkcioniše po principu procedure „zasnovanog na integritetu, kreirana saradnja, orijentisana na ljude, saradnja na dobitku“.Nadamo se da bismo mogli imati ugodnu romantičnu vezu sa poslovnim čovjekom iz cijelog okruženja.
Profesionalna KinaKina Taq DNK polimeraza i Qpcr, Naše poslovne aktivnosti i procesi su dizajnirani da osiguraju našim kupcima pristup najširem spektru proizvoda i rješenja sa najkraćim rokovima isporuke.Ovo dostignuće je omogućeno zahvaljujući našem visokostručnom i iskusnom timu.Tražimo ljude koji žele rasti s nama širom svijeta i izdvojiti se iz gomile.Sada imamo ljude koji prihvataju sutra, imaju viziju, vole da protežu svoje umove i idu daleko dalje od onoga što su mislili da je ostvarivo.
Nema pojačanja signala
1.Taq DNK polimeraza u kompletu gubi svoju aktivnost zbog nepravilnog skladištenja ili isteka kompleta.
Preporuka: Potvrdite uslove skladištenja kompleta;ponovo dodajte odgovarajuću količinu Taq DNK polimeraze u PCR sistem ili kupite novi komplet za PCR u realnom vremenu za povezane eksperimente.
2. Postoji mnogo inhibitora Taq DNK polimeraze u DNK šablonu.
Prijedlog: Pročistite šablon ili smanjite količinu korištenog šablona.
3. Koncentracija Mg2+ nije prikladna.
Preporuka: Koncentracija Mg2+ u 2× Real PCR mješavini koju pružamo je 3,5 mM.Međutim, za neke posebne prajmere i šablone, koncentracija Mg2+ može biti veća.Stoga možete direktno dodati MgCl2 kako biste optimizirali koncentraciju Mg2+.Preporučuje se povećanje Mg2+ za 0,5mM svaki put radi optimizacije.
4. Uslovi PCR amplifikacije nisu prikladni, a sekvenca prajmera ili koncentracija je neodgovarajuća.
Prijedlog: potvrdite ispravnost sekvence prajmera i prajmer nije degradiran;ako signal pojačanja nije dobar, pokušajte sniziti temperaturu žarenja i na odgovarajući način prilagoditi koncentraciju prajmera.
5. Količina šablona je premala ili prevelika.
Preporuka: Izvršite razblaživanje gradijentom linearizacije šablona i izaberite koncentraciju šablona sa najboljim PCR efektom za PCR eksperiment u realnom vremenu.
NTC ima previsoku vrijednost fluorescencije
1. Kontaminacija reagensom uzrokovana tokom rada.
Preporuka: Zamijenite novim reagensima za PCR eksperimente u realnom vremenu.
2. Do kontaminacije je došlo tokom pripreme PCR reakcijskog sistema.
Preporuka: Poduzmite potrebne zaštitne mjere tokom rada, kao što su: nošenje rukavica od lateksa, korištenje vrha pipete sa filterom itd.
3. Prajmeri su degradirani, a degradacija prajmera će uzrokovati nespecifično pojačanje.
Prijedlog: Koristite SDS-PAGE elektroforezu da otkrijete da li su prajmeri degradirani i zamijenite ih novim prajmerima za PCR eksperimente u realnom vremenu.
Dimer prajmera ili nespecifična amplifikacija
1. Koncentracija Mg2+ nije prikladna.
Preporuka: Koncentracija Mg2+ 2× Real PCR EasyTM mješavine koju nudimo je 3,5 mM.Međutim, za neke posebne prajmere i šablone, koncentracija Mg2+ može biti veća.Stoga možete direktno dodati MgCl2 kako biste optimizirali koncentraciju Mg2+.Preporučuje se povećanje Mg2+ za 0,5mM svaki put radi optimizacije.
2. Temperatura PCR žarenja je preniska.
Prijedlog: Svaki put povećajte temperaturu PCR žarenja za 1℃ ili 2℃.
3. PCR proizvod je predugačak.
Preporuka: Dužina PCR proizvoda u realnom vremenu treba da bude između 100-150bp, ne više od 500bp.
4. Prajmeri su degradirani, a degradacija prajmera će dovesti do pojave specifične amplifikacije.
Prijedlog: Koristite SDS-PAGE elektroforezu da otkrijete da li su prajmeri degradirani i zamijenite ih novim prajmerima za PCR eksperimente u realnom vremenu.
5. PCR sistem je neispravan ili je sistem premali.
Prijedlog: PCR reakcijski sistem je premali, što će uzrokovati smanjenje tačnosti detekcije.Najbolje je koristiti sistem reakcije koji preporučuje kvantitativni PCR instrument za ponovno izvođenje PCR eksperimenta u realnom vremenu.
Slaba ponovljivost kvantitativnih vrijednosti
1. Instrument je neispravan.
Prijedlog: Može postojati greške između svake PCR rupe na instrumentu, što rezultira lošom ponovljivošću tokom upravljanja temperaturom ili detekcije.Molimo provjerite prema uputama odgovarajućeg instrumenta.
2. Čistoća uzorka nije dobra.
Preporuka: Nečisti uzorci će dovesti do loše ponovljivosti eksperimenta, što uključuje čistoću šablona i prajmera.Najbolje je ponovo pročistiti šablon, a prajmeri se najbolje pročišćavaju pomoću SDS-PAGE.
3. Vrijeme pripreme i skladištenja PCR sistema je predugo.
Preporuka: Koristite PCR sistem u realnom vremenu za PCR eksperiment odmah nakon pripreme i ne ostavljajte ga predugo po strani.
4. Uslovi PCR amplifikacije nisu prikladni, a sekvenca prajmera ili koncentracija je neodgovarajuća.
Prijedlog: potvrdite ispravnost sekvence prajmera i prajmer nije degradiran;ako signal pojačanja nije dobar, pokušajte sniziti temperaturu žarenja i na odgovarajući način prilagoditi koncentraciju prajmera.
5. PCR sistem je neispravan ili je sistem premali.
Prijedlog: PCR reakcijski sistem je premali, što će uzrokovati smanjenje tačnosti detekcije.Najbolje je koristiti sistem reakcije koji preporučuje kvantitativni PCR instrument za ponovno izvođenje PCR eksperimenta u realnom vremenu.