Naš napredak zavisi od visoko razvijenih proizvoda, velikih talenata i stalno ojačanih tehnoloških snaga za fabričke snabdevanje Techstar reagensima za ekstrakciju i pročišćavanje nukleinske kiseline/Rna/DNK komplet za izolaciju, dok koristimo večnu svrhu „kontinuirano odlično poboljšanje, zadovoljstvo kupaca“, sigurni smo da je vrhunski kvalitet naših proizvoda stabilan, a naše rešenje i ugled su najbolji.
Naš napredak zavisi od visoko razvijenih proizvoda, velikih talenata i stalno jačanih tehnoloških snaga zaKineski reagens nukleinske kiseline i komplet za ekstrakciju DNK/RNK, Kako bismo ispunili sve veće zahtjeve kupaca kako kod kuće tako i u inostranstvu, nastavit ćemo sa promicanjem poslovnog duha „Kvaliteta, kreativnosti, efikasnosti i kredita“ i nastojati da budemo na vrhu trenutnog trenda i vodeće mode.Srdačno Vas pozdravljamo da posjetite našu kompaniju i ostvarite saradnju.
Uputstva za upotrebu:

 Naš napredak zavisi od visoko razvijenih proizvoda, velikih talenata i stalno ojačanih tehnoloških snaga za fabričke snabdevanje Techstar reagensima za ekstrakciju i pročišćavanje nukleinske kiseline/Rna/DNK komplet za izolaciju, dok koristimo večnu svrhu „kontinuirano odlično poboljšanje, zadovoljstvo kupaca“, sigurni smo da je vrhunski kvalitet naših proizvoda stabilan, a naše rešenje i ugled su najbolji.
Factory SupplyKineski reagens nukleinske kiseline i komplet za ekstrakciju DNK/RNK, Kako bismo ispunili sve veće zahtjeve kupaca kako kod kuće tako i u inostranstvu, nastavit ćemo sa promicanjem poslovnog duha „Kvaliteta, kreativnosti, efikasnosti i kredita“ i nastojati da budemo na vrhu trenutnog trenda i vodeće mode.Srdačno Vas pozdravljamo da posjetite našu kompaniju i ostvarite saradnju.

Vodič za analizu problema

Sljedeća analiza problema na koje možete naićiPlant TotalRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

Rotacioni stub je začepljen

Blokada spin kolone će uzrokovati smanjenje prinosa RNK ili čak nemogućnost pročišćavanja da bi se dobila RNK, a kvalitet dobijene RNK će biti nizak.

Analiza uobičajenih uzroka:

1. Uzorak nije potpuno slomljen.

Nepotpuna fragmentacija uzorka može blokirati kolonu za čišćenje DNK, što također može utjecati na prinos i kvalitet RNK.Preporučujemo da prilikom izvođenja fragmentacije uzorka brzo samljete dovoljne količine tekućeg dušika da razbijete tkiva kao što su ćelijski zidovi i ćelijske membrane uzoraka što je više moguće.Za biljne uzorke polifenol polisaharida, preporučujemo da koristite Plant Total RNA Isolation Kit Plus.

2.Aspirirajte izolovani supernatant iz kolone za čišćenje DNK, aspirirajte mogući talog ćelijskih ostataka.

Aspirirana peleta ćelijskih ostataka može začepiti kolonu samo za RNK tokom procedura adsorpcije RNK (pogledajte korak 5 postupka, korak 6 postupka polisaharidnog polifenola).Preporučujemo da se vodi računa pri aspiraciji ovog supernatanta kako bi se izbjeglo aspiriranje ostataka stanica.

3. Početna količina uzorka je prevelika.

Prekomjerna upotreba uzorka će rezultirati nepotpunom fragmentacijom uzorka ili nepotpunom lizom stanica puferom PRL1 ili puferom PSL1, što će rezultirati začepljenom kolonom za pročišćavanje za operacije pročišćavanja.Komplet za izolaciju ukupne RNA biljke ima početni maksimum od 50 mg po jednom prečišćavanju operiranog uzorka.Za biljne uzorke polifenol polisaharida, preporučujemo da isprobate Plant Total RNA Isolation Kit Plus.

4. Temperatura centrifuge je preniska.

Izolacija i prečišćavanje cijele RNK osim razbijanja tkiva uzorka tekućim dušikom, svi koraci se izvode na sobnoj temperaturi (20-25 °C).Neke niskotemperaturne centrifuge imaju temperature ispod 20 °C, što može uzrokovati blokade u koloni za čišćenje DNK i/ili koloni koja sadrži samo RNK.Ako se to dogodi, podesite temperaturu centrifuge na 20-25 °C i prethodno zagrijte smjesu za lizu i/ili dodavanje supernatanta za odvajanje etanola na 37 °C.

RNK se ne ekstrahuje ili je prinos RNK nizak

Obično postoji mnogo faktora koji utiču na efikasnost oporavka, kao što su: sadržaj RNK uzorka, način rada, zapremina eluiranja, itd.

Analiza uobičajenih uzroka kako slijedi:

1. U toku operacije izvršeno je ledeno kupatilo ili centrifugiranje na niskoj temperaturi (4°C).

Preporuka: Radite na sobnoj temperaturi (15-25°C) tokom cijelog procesa, nemojte raditi ledenu kupku i niskotemperaturno centrifugiranje.

       2.RNK je degradirana zbog nepravilnog čuvanja uzorka ili dugotrajnog čuvanja uzorka.

Preporuka: Svježe sakupljene uzorke treba brzo zamrznuti u tekućem dušiku, a zatim čuvati na -80°C duže vrijeme, izbjegavati ponovno zamrzavanje i odmrzavanje uzoraka;ili odmah potopite uzorke u otopinu RNA stabilizatora RNAlater (životinjski uzorci).

       3.Nedovoljna fragmentacija uzorka i liza dovode do blokade kolone za prečišćavanje.

Prijedlog: Prilikom mljevenja tkiva provjerite da li je tkivo dovoljno mljeveno i brzo ga prebacite u unaprijed pripremljeni pufer PSL1 (potvrdite da je dodat tačan udio β-ME, pogledajte 1. korak postupka).

4.Eluent je dodan pogrešno.

Prijedlog: Uvjerite se da je ddH bez RNase₂O se ukapa u sredinu membrane kolone za prečišćavanje.

5. Tačan volumen apsolutnog etanola nije dodan u pufer PSL2 ili pufer PRW2.

Prijedlog: Molimo slijedite upute, dodajte tačnu količinu apsolutnog etanola u pufer PSL2 i pufer PRW2 i dobro promiješajte prije upotrebe kompleta.

6. Količina uzorka tkiva je neprikladna.

Preporuka: Koristite 50 mg tkiva na 500 μl pufera PSL1.Upotreba previše tkiva će smanjiti količinu ekstrahirane RNK, a čistoća rezultirajuće RNK će također biti smanjena.Izričito preporučujemo da početna doza uzorka ne prelazi 50 mg po operaciji ekstrakcije RNK.

7. Neodgovarajući volumen eluiranja ili nepotpuno eluiranje.

Preporuka: Volumen eluenta kolone za prečišćavanje je 50-200 μl;ako učinak eluiranja nije zadovoljavajući, preporučuje se produžiti vrijeme na sobnoj temperaturi nakon dodavanja prethodno zagrijanog ddH bez RNase₂O, kao što je 5-10 min.

8. Kolona za prečišćavanje ima ostatak etanola nakon pranja puferom PRW2.

   Preporuka: Ako se prazna epruveta centrifugira 1 min, a nakon ispiranja u puferu PRW2 i dalje ima preostalog etanola, možete povećati vrijeme centrifugiranja prazne epruvete na 2 minute ili staviti kolonu za pročišćavanje na sobnu temperaturu na 5 minuta kako biste u potpunosti uklonili preostali etanol.

9.Kit je pogrešno korišten.

   Prijedlog: Za biljne uzorke polifenolnih polisaharida, korištenje uobičajenih kompleta kao što je komplet za izolaciju ukupne RNA biljke možda neće moći dobiti idealne uzorke RNK.Preporučujemo vam da koristite Plant Total RNA IsolationKit Plus, koji je posebno dizajniran za uzorke biljaka polifenolnih polisaharida.Komplet posebno razvijen za ekstrakciju RNK iz biljnih uzoraka polifenola i polisaharida.

Vrijednost OD260/OD280 je niska

RNK eluiranje sa ddH₂O i korišteno za očitavanja spektrofotometra rezultira niskim vrijednostima OD260/OD280.Preporučujemo upotrebu 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 (umjesto ddH bez RNase₂O za eluiranje RNK) da biste dobili relativno tačne vrijednosti OD260/OD280, pogledajte “Analize koncentracije i pročišćavanja RNK” na stranici 19.

Prečišćena RNK se razgrađuje

Kvalitet pročišćene RNK povezan je s faktorima kao što su očuvanje uzorka, kontaminacija RNKazom i manipulacija.

Analiza uobičajenih uzroka:

1. Uzorci tkiva nisu pohranjeni na vrijeme nakon prikupljanja.

    Preporuka: Ako se uzorci tkiva ne koriste na vrijeme nakon sakupljanja, molimo da ih odmah pohranite u tekućem dušiku na niskoj temperaturi ili ih premjestite na -80°C za dugotrajno skladištenje nakon brzog zamrzavanja u tekućem dušiku, ili odmah uronite uzorke u otopinu RNA stabilizatora RNAlater (životinjski uzorci).Za ekstrakciju RNK pokušajte koristiti svježe sakupljene uzorke tkiva.

2. Ponovljeno zamrzavanje i odmrzavanje uzoraka tkiva.

   Preporuka: Prilikom pohranjivanja uzoraka tkiva, najbolje ih je izrezati na male komadiće radi očuvanja, a prilikom upotrebe izvaditi dio kako bi se izbjegla degradacija RNK uzrokovana ponovljenim zamrzavanjem i odmrzavanje uzoraka.

3.RNase se uvodi u operacijsku salu ili se ne nose jednokratne rukavice, maske itd.

   Preporuka: Eksperimente ekstrakcije RNK najbolje je izvoditi u odvojenim RNA operacijama, a laboratorijski sto treba očistiti prije eksperimenta, a tokom eksperimenta treba nositi jednokratne rukavice i maske kako bi se izbjegla degradacija RNK uzrokovana uvođenjem RNase u najvećoj mjeri.

4. Reagens je kontaminiran RNazom tokom upotrebe.

   Prijedlog: Zamijenite novom serijom kompleta za ekstrakciju ukupne RNK biljaka za povezane eksperimente.

5. Centrifugalne epruvete i vrhovi pipete koji se koriste za manipulaciju RNK kontaminirani su RNase.

Prijedlog: Uvjerite se da epruvete za centrifugiranje, vrhovi pipeta, pipete itd. koji se koriste za ekstrakciju RNK ne sadrže RNKazu.

Uputstva za upotrebu:

Priručnik za upotrebu kompleta za izolaciju ukupne RNA biljke