pridržavati se ugovora”, u skladu sa zahtjevima tržišta, svojim dobrim kvalitetom izvlači se iz tržišne konkurencije i pruža sveobuhvatniju i vrhunsku podršku kupcima kako bi postali veliki pobjednici.Potraga za kompanijom, definitivno je zadovoljstvo klijenata za Kini novi proizvod najprodavaniji komplet za ekstrakciju virusne DNK&Rna, proširili smo naše poslovanje na Njemačku, Tursku, Kanadu, SAD, Indoneziju, Indiju, Nigeriju, Brazil i neke druge regije svijeta.Trudimo se da budemo jedan od najboljih svjetskih dobavljača.
pridržavati se ugovora”, u skladu sa zahtjevima tržišta, svojim dobrim kvalitetom izvlači se iz tržišne konkurencije i pruža sveobuhvatniju i vrhunsku podršku kupcima kako bi postali veliki pobjednici.Poslovanje kompanije je definitivno zadovoljstvo klijenataKina komplet za ekstrakciju Rna&DNK i ekstrakciju nukleinske kiseline, Radujemo se uspostavljanju obostrano korisnog odnosa s vama na temelju naših visokokvalitetnih proizvoda i rješenja, razumnih cijena i najbolje usluge.Nadamo se da će vam naši proizvodi donijeti ugodno iskustvo i donijeti osjećaj ljepote.
Uputstva za upotrebu:Plant Total RNA Isolation Kit Plus Uputstvo za upotrebu

pridržavati se ugovora”, u skladu sa zahtjevima tržišta, svojim dobrim kvalitetom izvlači se iz tržišne konkurencije i pruža sveobuhvatniju i vrhunsku podršku kupcima kako bi postali veliki pobjednici.Potraga za kompanijom, definitivno je zadovoljstvo klijenata za Kini novi proizvod najprodavaniji komplet za ekstrakciju virusne DNK&Rna, proširili smo naše poslovanje na Njemačku, Tursku, Kanadu, SAD, Indoneziju, Indiju, Nigeriju, Brazil i neke druge regije svijeta.Trudimo se da budemo jedan od najboljih svjetskih dobavljača.
Kina Novi proizvod Kineski komplet za ekstrakciju Rna&DNK i ekstrakciju nukleinske kiseline, radujemo se uspostavljanju obostrano korisnog odnosa s vama na osnovu naših visokokvalitetnih proizvoda i rješenja, razumnih cijena i najbolje usluge.Nadamo se da će vam naši proizvodi donijeti ugodno iskustvo i donijeti osjećaj ljepote.

Kolona se začepila

Nakon začepljenja kolone, prinos RNK je smanjen ili čak nemoguće pročistiti RNK, a dobijena RNK masa je niska.

Analiza uobičajenih uzroka:

1. Pauze uzoraka nisu temeljne.

Lomljenje uzorka ne uzrokuje potpuno blokiranje KOLONE ZA ČIŠĆENJE DNK, a utječe na prinos i kvalitet RNK.Preporučujemo brzu operaciju mljevenja u dovoljnoj količini tekućeg dušika kada razbijete uzorke. Pokušajte slomiti ćelijski zid uzorka, ćelijsku membranu i drugo tkivo.Za biljne uzorke poliol polisaharida, preporučujemo da koristite Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

2. Prilikom usisavanja odvojenog supernatanta uzorka pomoću kolone za čišćenje DNK, mogući ćelijski fragmentirani precipitat se može udahnuti.

Uzeti ćelijski fragmentirani sedimenti će uzrokovati kolonu SAMO RNK koja će biti blokirana kada se izvrši operacija adsorpcije RNK (pogledajte korak 6).Preporučujemo da pažljivo usisavate ovaj supernatant kako biste izbjegli usisavanje staničnih ostataka.

3. Početna količina uzorka je prevelika.

Prekomjerna upotreba uzorka će dovesti do nepotpune fragmentacije uzorka ili nepotpune ćelijske lize puferom PSL1, što će rezultirati blokadom kolone za prečišćavanje tokom prečišćavanja.Komplet za izolaciju ukupne RNK biljaka Svaki pojedinačni pročišćeni operativni uzorak je 50 mg.Za biljne uzorke poliol polisaharida, preporučujemo da isprobate Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

4. Temperatura centrifuge je preniska.

Cijeli proces izolacije i pročišćavanja RNK odvija se na sobnoj temperaturi (20-25°C), osim što je tkivo uzorka razbijeno tečnim azotom. Temperatura nekih kriogenih centrifuga je niža od 20℃, što može uzrokovati blokadu kolone za čišćenje DNK i/ili kolone samo za RNA.Ako se to dogodi, podesite temperaturu centrifuge na 20-25℃, iprovjerite jesu li smjesa za lizu i/ili supernatant s dodatkom etanola prethodno zagrijani na 37°C.

RNK se ne ekstrahuje ili je prinos RNK nizak

Obično postoji mnogo faktora koji utiču na efikasnost oporavka, kao što su: sadržaj RNK uzorka, način rada, zapremina eluiranja, itd.

Analiza uobičajenih uzroka kako slijedi:

1. U toku operacije izvršeno je ledeno kupatilo ili centrifugiranje na niskoj temperaturi (4°C).

Preporuka: Radite na sobnoj temperaturi (15-25°C) u cijelom procesu nemojte raditi ledenu kupku i niskotemperaturno centrifugiranje.

2. RNK je degradirana zbog nepravilnog čuvanja uzorka ili dugotrajnog čuvanja uzorka.

Preporuka: Svježe sakupljene uzorke treba brzo zamrznuti u tekućem dušiku, a zatim čuvati na -80°C duže vrijeme, izbjegavati ponovno zamrzavanje i odmrzavanje uzoraka;ili odmah potopite uzorke u otopinu RNA stabilizatora RNAlater (životinjski uzorci).

3. Nedovoljna fragmentacija uzorka i liza dovode do blokade kolone za prečišćavanje.

Prijedlog: Prilikom mljevenja tkiva provjerite da li je tkivo dovoljno mljeveno i brzo ga prebacite u unaprijed pripremljeni pufer PSL1 (potvrdite da je dodat tačan udio β-ME, pogledajte 1. korak postupka).

4.Eluent je dodan pogrešno.

Prijedlog: Uvjerite se da je ddH2O bez RNase ukapan u sredinu membrane kolone za prečišćavanje.

5. Tačan volumen apsolutnog etanola nije dodan u pufer PSL2 ili pufer PRW2.

Prijedlog: Molimo slijedite upute, dodajte tačnu količinu apsolutnog etanola u pufer PSL2 i pufer PRW2 i dobro promiješajte prije upotrebe kompleta.

6. Količina uzorka tkiva je neprikladna.

Preporuka: Koristite 50 mg tkiva na 500 μl pufera PSL1.Upotreba previše tkiva će smanjiti količinu ekstrahirane RNK, a čistoća rezultirajuće RNK će također biti smanjena.Izričito preporučujemo da početna doza uzorka ne prelazi 50 mg po operaciji ekstrakcije RNK.

7. Neodgovarajući volumen eluiranja ili nepotpuno eluiranje.

Preporuka: Volumen eluenta kolone za prečišćavanje je 50-200 μl;ako učinak eluiranja nije zadovoljavajući, preporučuje se produžiti vrijeme na sobnoj temperaturi nakon dodavanja prethodno zagrijanog ddH2O bez RNaze, kao što je 5-10 min.

8. Kolona za prečišćavanje ima ostatak etanola nakon ispiranja sa BufferPRW2.

Preporuka: Ako se prazna epruveta centrifugira 1 min, a nakon ispiranja u puferu PRW2 i dalje ima preostalog etanola, možete povećati vrijeme centrifugiranja prazne epruvete na 2 minute ili staviti kolonu za pročišćavanje na sobnu temperaturu na 5 minuta kako biste u potpunosti uklonili preostali etanol.

9.Kit je pogrešno korišten.

Prijedlog: Za biljne uzorke polifenolnih polisaharida, korištenje uobičajenih kompleta kao što je komplet za izolaciju ukupne RNA biljke možda neće moći dobiti idealne uzorke RNK.Preporučujemo vam da koristite Plant Total RNA IsolationKit Plus, koji je posebno dizajniran za uzorke biljaka polifenolnih polisaharida.Komplet posebno razvijen za ekstrakciju RNK iz biljnih uzoraka polifenola i polisaharida.

Vrijednost OD260/OD280 je niska

RNK eluiranje sa ddH2O i korišteno za očitavanja spektrofotometra rezultira niskim vrijednostima OD260/OD280.Preporučujemo upotrebu 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 (umjesto ddH2O bez RNaze za eluiranje RNK) da biste dobili relativno tačne vrijednosti OD260/OD280, pogledajte “Analize koncentracije i pročišćavanja RNK” na stranici 19.

Prečišćena RNK se razgrađuje

Kvalitet pročišćene RNK povezan je s faktorima kao što su očuvanje uzorka, kontaminacija RNKazom i manipulacija.

Analiza uobičajenih uzroka:

1. Uzorci tkiva nisu pohranjeni na vrijeme nakon prikupljanja.

Preporuka: Ako se uzorci tkiva ne koriste na vrijeme nakon sakupljanja, molimo da ih odmah pohranite u tekućem dušiku na niskoj temperaturi ili ih premjestite na -80°C za dugotrajno skladištenje nakon brzog zamrzavanja u tekućem dušiku, ili odmah uronite uzorke u otopinu RNA stabilizatora RNAlater (životinjski uzorci).Za ekstrakciju RNK pokušajte koristiti svježe sakupljene uzorke tkiva.

2. Ponovljeno zamrzavanje i odmrzavanje uzoraka tkiva.

Preporuka: Prilikom pohranjivanja uzoraka tkiva, najbolje ih je izrezati na male komadiće radi očuvanja, a prilikom upotrebe izvaditi dio kako bi se izbjegla degradacija RNK uzrokovana ponovljenim zamrzavanjem i odmrzavanje uzoraka.

3.RNase se uvodi u operacijsku salu ili se ne nose jednokratne rukavice, maske itd.

Preporuka: Eksperimente ekstrakcije RNK najbolje je izvoditi u odvojenim RNA operacijama, a laboratorijski sto treba očistiti prije eksperimenta, a tokom eksperimenta treba nositi jednokratne rukavice i maske kako bi se izbjegla degradacija RNK uzrokovana uvođenjem RNase u najvećoj mjeri.

4. Reagens je kontaminiran RNazom tokom upotrebe.

Prijedlog: Zamijenite novom serijom kompleta za ekstrakciju ukupne RNK biljaka za povezane eksperimente.

5. Centrifugalne epruvete i vrhovi pipete koji se koriste za manipulaciju RNK kontaminirani su RNase.

Prijedlog: Uvjerite se da epruvete za centrifugiranje, vrhovi pipeta, pipete itd. koji se koriste za ekstrakciju RNK ne sadrže RNKazu.

Uputstva za upotrebu:

Plant Total RNA Isolation Kit Plus Uputstvo za upotrebu