Kineski proizvođač za 2× koncentriranu premiks za nepročišćeni uzorak kvantitativnu PCR direktnu multipleks sondu u realnom vremenu Qpcr Mix Plus U
Organizacija nastavlja na konceptu procedure „naučno upravljanje, visok kvalitet i primat efikasnosti, kupac vrhunski za Kineski proizvođač za 2× koncentrirani premiks za nepročišćeni uzorak u realnom vremenu kvantitativna PCR direktna multipleks sonda Qpcr Mix Plus U, Naš posao je posvećen pružanju klijentima značajnih i sigurnih proizvoda vrhunskog kvaliteta po agresivnoj cijeni, udovoljavajući svakoj našoj usluzi.
Organizacija se pridržava koncepta procedure „naučno upravljanje, visok kvalitet i efikasnost primat, kupac vrhovni zaKina Taq DNK polimeraza i Qpcr, Naša kompanija ima veliku snagu i posjeduje stabilan i savršen sistem prodajne mreže.Želimo da uspostavimo dobre poslovne odnose sa svim kupcima iz zemlje i inostranstva na osnovu obostrane koristi.
Principi dizajna prajmera za PCR u realnom vremenu
Forward Primer i Reverse Primer
Za PCR u realnom vremenu, dizajn prajmera je veoma važan.Prajmeri se odnose na specifičnost i efikasnost PCR amplifikacije, a mogu se dizajnirati prema sljedećim principima:
- Dužina prajmera: 18-30bp.
- GC sadržaj: 40-60%.
- Tm vrijednost: Softver za dizajn prajmera, kao što je Primer 5, može dati Tm vrijednost prajmera.Vrijednosti Tm uzvodnih i nizvodnih prajmera trebaju biti što je moguće bliže.Može se koristiti i formula za proračun Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Prilikom izvođenja PCR-a, temperatura ispod Tm vrijednosti prajmera od 5 °C općenito se bira kao temperatura žarenja (odgovarajuće povećanje temperature žarenja može povećati specifičnost PCR reakcije).
- Prajmeri i PCR proizvodi:
- Dizajn prajmera PCR amplifikacije dužine proizvoda je poželjno 100-150bp.
- Dizajnerske prajmere u sekundarnoj strukturnoj oblasti šablona treba izbegavati što je više moguće.
- Izbjegavajte stvaranje 2 ili više komplementarnih baza između 3′ krajeva uzvodnih i nizvodnih prajmera.
- Prajmer 3′ terminalna baza ne može biti prisutna sa 3 dodatna uzastopna G ili C.
- Sami prajmeri ne mogu imati komplementarne strukture, inače će se formirati struktura ukosnice koja utiče na PCR amplifikaciju.
- ATCG bi trebao biti raspoređen što je moguće ravnomjernije u sekvenci prajmera, a 3′ terminalnu bazu treba izbjegavati kao T.
Dodatak1:Cell DirectRT-qPCR Kit component paket dodataka
1. Rešenje za lizu ćelija
Rastvor za lizu ćelija | |||
Komponente kompleta (sistem za lizu sa 24 jažice / bunar) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
PartI | Buffer CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
PartII | DNK Eraser | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Komponente kompleta (20 μl reakcijski sistem) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
ddH bez RNaze2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR Mix | ||
Komponente kompleta (20 μl reakcijski sistem) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× ROX referentna boja | 40 μl | 200 μl |
ddH bez RNaze2O | 1,7 ml | 10 ml |
Organizacija nastavlja na konceptu procedure „naučno upravljanje, visok kvalitet i primat efikasnosti, kupac vrhunski za Kineski proizvođač za 2× koncentrirani premiks za nepročišćeni uzorak u realnom vremenu kvantitativna PCR direktna multipleks sonda Qpcr Mix Plus U, Naš posao je posvećen pružanju klijentima značajnih i sigurnih proizvoda vrhunskog kvaliteta po agresivnoj cijeni, udovoljavajući svakoj našoj usluzi.
Kina Proizvođač zaKina Taq DNK polimeraza i Qpcr, Naša kompanija ima veliku snagu i posjeduje stabilan i savršen sistem prodajne mreže.Želimo da uspostavimo dobre poslovne odnose sa svim kupcima iz zemlje i inostranstva na osnovu obostrane koristi.
Principi dizajna prajmera za PCR u realnom vremenu
Forward Primer i Reverse Primer
Za PCR u realnom vremenu, dizajn prajmera je veoma važan.Prajmeri se odnose na specifičnost i efikasnost PCR amplifikacije, a mogu se dizajnirati prema sljedećim principima:
- Dužina prajmera: 18-30bp.
- GC sadržaj: 40-60%.
- Tm vrijednost: Softver za dizajn prajmera, kao što je Primer 5, može dati Tm vrijednost prajmera.Vrijednosti Tm uzvodnih i nizvodnih prajmera trebaju biti što je moguće bliže.Može se koristiti i formula za proračun Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Prilikom izvođenja PCR-a, temperatura ispod Tm vrijednosti prajmera od 5 °C općenito se bira kao temperatura žarenja (odgovarajuće povećanje temperature žarenja može povećati specifičnost PCR reakcije).
- Prajmeri i PCR proizvodi:
- Dizajn prajmera PCR amplifikacije dužine proizvoda je poželjno 100-150bp.
- Dizajnerske prajmere u sekundarnoj strukturnoj oblasti šablona treba izbegavati što je više moguće.
- Izbjegavajte stvaranje 2 ili više komplementarnih baza između 3′ krajeva uzvodnih i nizvodnih prajmera.
- Prajmer 3′ terminalna baza ne može biti prisutna sa 3 dodatna uzastopna G ili C.
- Sami prajmeri ne mogu imati komplementarne strukture, inače će se formirati struktura ukosnice koja utiče na PCR amplifikaciju.
- ATCG bi trebao biti raspoređen što je moguće ravnomjernije u sekvenci prajmera, a 3′ terminalnu bazu treba izbjegavati kao T.
Dodatak1:Cell DirectRT-qPCR Kit component paket dodataka
1. Rešenje za lizu ćelija
Rastvor za lizu ćelija | |||
Komponente kompleta (sistem za lizu sa 24 jažice / bunar) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
PartI | Buffer CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
PartII | DNK Eraser | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Komponente kompleta (20 μl reakcijski sistem) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
ddH bez RNaze2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR Mix | ||
Komponente kompleta (20 μl reakcijski sistem) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× ROX referentna boja | 40 μl | 200 μl |
ddH bez RNaze2O | 1,7 ml | 10 ml |
Uputstva za upotrebu: