Komplet za izolaciju RNK krvi
Opis kompleta:
Kat.br.RE-04011/04013
Za potpuno pročišćavanje RNK iz pune krvi 104 ≤ bijelih krvnih zrnaca ≤ 107
Brzo izolujte i pročistite krvnu RNK od bijelih krvnih stanica.
-Nema potrebe da brinete o degradaciji RNK.Cijeli komplet je bez RNase
-Jednostavno—sve operacije se obavljaju na sobnoj temperaturi
-Brzo—operacija se može završiti za 20 minuta
-Visoki prinos RNK: Kolona koja sadrži samo RNK i jedinstvena formula mogu efikasno pročistiti RNK
-Sigurno—ne koristi se organski reagens
-Veliki kapacitet obrade uzoraka—do 200μl uzoraka se može obraditi svaki put.
-Visok kvalitet—pročišćena RNK je vrlo čista, bez proteina i drugih nečistoća, i može zadovoljiti različite nizvodne eksperimentalne primjene.
Opisi
Komplet usvaja spin kolonu i formulu koju je razvila naša kompanija, koja može efikasno izdvojiti ukupnu RNK visoke čistoće i visokog kvaliteta iz antikoagulirane pune krvi.Komplet sadrži lizat crvenih krvnih zrnaca (Buffer RCL), koji može brzo i efikasno lizirati crvena krvna zrnca i zadržati bela krvna zrnca.Efikasna kolona za čišćenje DNK može lako odvojiti supernatant i ćelijske lizate i adsorbovati i ukloniti genomsku DNK.Operacija je jednostavna i štedi vrijeme;Kolona koja sadrži samo RNK može efikasno da veže RNK, a sa jedinstvenom formulom može istovremeno da obrađuje veliki broj uzoraka.
Čitav sistem bez RNase čini ekstrahovanu RNK nerazgradivom;Pufer RW1 i Pufer RW2 sistem za ispiranje pufera čini dobijenu RNK bez proteina, DNK, jona i zagađenja organskim jedinjenjima.
Sadržaj kompleta
| Komplet za izolaciju ukupne RNA u krvi | ||
| Sastav kompleta | RE-04011 | RE-04013 |
| 50 puta | 200 puta | |
| Buffer RCL (10×) | 52,5 mL | 210mL |
| Međuspremnik BRL1* | 30mL | 120mL |
| Pufer BRL2 | 18mL | 66mL |
| Međuspremnik RW1* | 25mL | 100mL |
| Buffer RW2 | 24mL | 96mL |
| ddH bez RNaze2 O | 10mL | 40mL |
| Kolona samo za RNK | 50 kompleta | 200 kompleta |
| Kolona za čišćenje DNK | 50 kompleta | 200 kompleta |
| priručnik | 1 primjerak | 1 primjerak |
Karakteristike&prednosti
-Nema potrebe da brinete o degradaciji RNK.Cijeli komplet je bez RNase.
-Jednostavno—sve operacije se obavljaju na sobnoj temperaturi.
-Brzo—operacija se može završiti za 20 minuta.
-Visoki prinos RNK: Kolona koja sadrži samo RNK i jedinstvena formula mogu efikasno pročistiti RNK.
-Sigurno—ne koristi se organski reagens.
-Veliki kapacitet obrade uzoraka—do 200μl uzoraka se može obraditi svaki put.
-Visok kvalitet—pročišćena RNK je vrlo čista, bez proteina i drugih nečistoća, i može zadovoljiti različite nizvodne eksperimentalne primjene.
Parametri kompleta
Aplikacija kompleta:
Pogodan je za ekstrakciju i pročišćavanje ukupne RNK iz pune krvi sisara.
Radni tok
Uslovi skladištenja
Pufer RCL (10×) treba čuvati na 2-8 ℃;ostale komponente kompleta mogu se čuvati na sobnoj temperaturi (15-25 ℃) u suvim uslovima i mogu se čuvati 12 meseci.Pufer BRL1 se može čuvati na 4 ℃ 1 mjesec nakon dodavanja β-merkaptoetanola (opciono).
Napomena: Ako se čuva na niskoj temperaturi, rastvor je sklon taloženju.Obavezno stavite otopinu u komplet na sobnu temperaturu neko vrijeme prije upotrebe.Ako je potrebno, zagrijte ga u vodenom kupatilu na 37°C 10 minuta da se talog otopi, a prije upotrebe dobro promiješajte.
Vodiči za analizu problema
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
RNK se ne može ekstrahovati ili je prinos nukleinske kiseline nizak
Obično postoji mnogo faktora koji utiču na efikasnost oporavka, kao što su: sadržaj RNK uzorka, način rada, zapremina eluiranja, itd.
Analiza uobičajenih uzroka:
1.Ledeno kupatilo ili centrifugiranje na niskoj temperaturi (4°C) tokom rada.
Preporuka: Rad na sobnoj temperaturi (15-25°C), nikada ledena kupka i niskotemperaturna centrifuga.
2. Nepravilno skladištenje uzoraka ili skladištenje uzoraka predugo.
Preporuka: Čuvajte uzorke na -80 °C ili zamrznite u tekućem dušiku i izbjegavajte ponovnu upotrebu zamrzavanja-odmrzavanja;pokušajte koristiti svježe prikupljene uzorke za ekstrakciju RNK.
3.Nedovoljna liza uzorka
Preporuka: Uvjerite se da su uzorak i radna otopina (linearni akrilamid) temeljito pomiješani i inkubirani 10 minuta na sobnoj temperaturi (15-25 °C)
4.Eluent je dodan pogrešno
Preporuka: Uvjerite se da je ddH2O bez RNase dodat u sredinu membrane kolone za pročišćavanje
5. Neodgovarajuća zapremina bezvodnog etanola u puferu viRW2
Prijedlog: Molimo slijedite upute, dodajte odgovarajuću količinu bezvodnog etanola u Puffer viRW2 i dobro ih promiješajte prije upotrebe kompleta.
6. Nepravilna upotreba uzorka.
Preporuka: 200µl uzorka na 500µl Buffer viRL.Prevelik volumen uzorka će rezultirati smanjenom stopom ekstrakcije RNK.
7. Nepravilan volumen eluiranja ili nepotpuno eluiranje.
Preporuka: Volumen eluenta kolone za prečišćavanje je 30-50μl;ako efekat eluiranja nije zadovoljavajući, preporučuje se dodavanje prethodno zagrijanog ddH bez RNase2O i produžite vrijeme stavljanja na sobnu temperaturu, kao što je 5-10 min
8. Kolona za prečišćavanje ima ostatke etanola nakon ispiranja u puferu viRW2.
Preporuka: Ako etanol i dalje ostaje nakon ispiranja u puferu viRW2 i centrifugiranja prazne epruvete u trajanju od 2 minute, kolona za pročišćavanje može se ostaviti na sobnoj temperaturi 5 minuta nakon centrifugiranja u praznoj epruveti kako bi se u potpunosti uklonio preostali etanol.
Degradacija pročišćenih RNA molekula
Kvalitet pročišćene RNK povezan je s faktorima kao što su skladištenje uzoraka, kontaminacija RNK-azom i rad.
Analiza uobičajenih uzroka:
1. Prikupljeni uzorci nisu sačuvani na vrijeme.
Preporuka: Ako se uzorak ne iskoristi na vrijeme nakon sakupljanja, odmah ga pohranite na -80 ℃ ili tečnom dušiku.Za ekstrakciju RNA molekula pokušajte koristiti svježe sakupljene uzorke kad god je to moguće.
2. Prikupljeni uzorci su se više puta smrzavali i odmrzavali.
Preporuka: Izbjegavajte ponovno zamrzavanje i odmrzavanje (ne više od jednom) tokom prikupljanja i skladištenja uzoraka, inače će se smanjiti prinos nukleinske kiseline.
3.RNase je uvedena u operacionu salu ili se nisu nosile jednokratne rukavice, maske i sl.
Prijedlog: Eksperiment ekstrakcije RNA molekula najbolje je izvesti u posebnoj RNA operacijskoj sali, a eksperimentalni sto se očisti prije eksperimenta.Nosite rukavice i maske za jednokratnu upotrebu tokom eksperimenta kako biste izbjegli degradaciju RNK uzrokovanu uvođenjem RNase.
4. Reagens je kontaminiran RNazom tokom upotrebe.
Prijedlog: Zamijenite novim kompletom za izolaciju virusne RNK za povezane eksperimente.
5. Kontaminacija centrifugalnih epruveta, vrhova pipeta, itd. RNase. Predlog: Uverite se da su epruvete za centrifugiranje, vrhovi pipete i pipete bez RNaze.
Pročišćeni RNA molekuli utjecali su na nizvodne eksperimente
Molekuli RNK pročišćeni kolonom za pročišćavanje će utjecati na nizvodne eksperimente ako ima previše jona soli ili proteina, kao što su: reverzna transkripcija, Northern blot, itd.。
1. Postoje preostali joni soli u eluiranim RNA molekulima.
Preporuka: Uvjerite se da je u pufer viRW2 dodan ispravan volumen bezvodnog etanola i dvaput operite kolonu za pročišćavanje prema ispravnoj brzini centrifugiranja u uputama za upotrebu; Ako još ima jona soli, možete dodati pufer viRW2 u kolonu za pročišćavanje i ostaviti je na sobnoj temperaturi 5 min.Zatim izvršite centrifugiranje kako biste u najvećoj mjeri uklonili kontaminaciju ionima soli
2. U eluiranim RNA molekulima ima preostalog etanola
Prijedlog: nakon što potvrdite da su kolone za prečišćavanje isprane Bufferom viRW2, izvršite centrifugiranje prazne epruvete prema brzini centrifuge u uputama za upotrebu.Ako još uvijek ima preostalog etanola, može se ostaviti 5 minuta na sobnoj temperaturi nakon centrifugiranja u praznoj epruveti kako bi se u najvećoj mjeri uklonio preostali etanol.
Uputstva za upotrebu:
Priručnik za upotrebu kompleta za izolaciju virusne RNA
