Hot-start Taq enzim se široko koristi.U poređenju sa običnom DNK polimerazom, hot-start Taq enzim može efikasno izbjeći neke nespecifične amplifikacije i formiranje prajmera dimera, i može efikasno poboljšati stopu uspjeha amplifikacije ciljnog gena.Posebno u polju genetskog testiranja, hot-start Taq enzim je identificiran kao obavezan standard u industriji, a obična DNK polimeraza se ne bi trebala koristiti.Kao što se može vidjeti iz gore navedenog, hot-start Taq enzimi se široko koriste.Trenutno na domaćem tržištu postoji mnogo marki hot-start Taq enzima, ali nema mnogo visokokvalitetnih Taq enzima sa vrućim startom.Suočeni s toliko Taq enzimskih proizvoda s vrućim startom, kako da izaberemo?

1. Odaberite hot-start Taq enzim sa visokom efikasnošću amplifikacije

Efikasnost PCR amplifikacije je usko povezana sa performansama Taq enzima.Nakon što je dobar sistem reakcije Taq enzima optimizovan, efikasnost amplifikacije je iznad 95%, a opseg amplifikacije početne količine šablona je širok.Zadovoljavajuća amplifikacija se može postići kada je sadržaj ciljnog gena nizak, i nije se lako otrovati kada je količina šablona velika, a period eksponencijalne amplifikacije je dug.Za Taq enzim sa lošim performansama, čak i ako je reakcioni sistem optimizovan mnogo puta, efikasnost amplifikacije je i dalje manja od 90%, "S" oblik krivulje amplifikacije nije očigledan, nagib je mali, a kriva ravna.Kada je količina šablona mala, ne može se pojačati, a kada je količina šablona velika, efekat pojačanja nije idealan.Stoga je odabir DNK polimeraza sa visokom efikasnošću amplifikacije ključan za uspjeh PCR i qPCR.

2. Odaberite Taq enzim s vrućim startom sa jakom snagom enzima

Enzimska snaga Taq enzima je povezana sa efikasnošću amplifikacije.Općenito, što je jača enzimska snaga Taq enzima s vrućim startom, to je duži period eksponencijalnog rasta PCR amplifikacije, tipičnija kriva u obliku slova S, veća je vrijednost signala fluorescencije i pogodnija za multipleks PCR detekciju.DNK polimeraze marke sa slabom enzimskom snagom općenito mogu podržati samo 2-plex reakcije.Kada se rade 3-plex reakcije, kriva amplifikacije je niska, vrijednost fluorescentnog signala je niska i ne postoji tipična kriva pojačanja, tako da je teško procijeniti rezultate.

3. Odaberite Taq enzim sa vrućim startom sa visokom osjetljivošću

Uopšteno govoreći, DNK polimeraza ima visoku efikasnost amplifikacije i visoku osetljivost, ali postoje i nedoslednosti.Ako je obilje ciljnog gena u uzorku koji se amplificira nisko, preporučuje se testiranje osjetljivosti amplifikacije Taq enzima.Najčešća metoda detekcije je izvođenje 10-strukog ili 5-strukog gradijentnog razrjeđivanja fragmenta plazmida ciljnog gena, izvođenje PCR detekcije pri nižem razrjeđenju i odabir Taq enzima s vrućim startom sa većom osjetljivošću detekcije.

Iz navedenog se može vidjeti da istraživači treba da biraju prema vlastitim eksperimentalnim zahtjevima i uslovima finansiranja.Najbolje je napraviti eksperiment pojačanja s gradijentom razrjeđivanja kako bi se otkrila efikasnost amplifikacije i osjetljivost Taq enzima s vrućim startom.

Primjer Foregena's Taq DNK polimeraza:

Foreasy HS Taq DNK polimeraza

Opis

Foreasy HS Taq DNK polimeraza je DNK polimeraza izražena u Escherichia coli inženjerskim bakterijama tehnologijom rekombinacije gena.Enzim je kombinovan sa jedinstvenim reakcionim puferom, koji proizvod čini veoma otpornim i kompatibilnim, i može direktno da koristi lizat uzorka (Foregene Lysis sistem) kao šablon za reakcije detekcije.

Aplikacija

Kvalitativna PCR i kvantitativna PCR detekcija pročišćenih šablona i nepročišćenih šablona.

Kontrola kvaliteta

1. Nije otkrivena aktivnost egzogene nukleaze

2.PCR metoda za otkrivanje rezidualne genomske DNK bez domaćina

3. Može efikasno pojačati gene sa jednom kopijom u ljudskom genomu

4. Čuvati na sobnoj temperaturi nedelju dana, bez očiglednih promena aktivnosti

Detalji o proizvodu: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/