Rođenje PCR-a
PCR (lančana reakcija polimeraze)
Prošlo je više od 30 godina od pronalaska lančane reakcije polimeraze.Više od 30 godina, nakon što brojni naučnici širom svijeta nastavljaju da dopunjuju i poboljšavaju, PCR tehnologija je postala najšire i najčešće korištena i najvažnija osnovna metoda istraživanja u cijeloj oblasti prirodnih znanosti.
TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR, itd. razvijeni na bazi široke primjene tradicionalne PCR tehnologije, kao i novonastali digitalni PCR (digitalni PCR), uvelike su obogatili istraživačke metode većine naučnih istraživača i uvelike ubrzali razvojni proces modernih nauka o životu, posebno molekularne biologije, dali su veliki doprinos proučavanju života čovjeka u cijelosti i prirodi.
Defekti tradicionalne PCR tehnologije
Kompleksno odvajanje nukleinskih kiselina iekstrakcija:
★ Tradicionalna PCR tehnologija: potrebno
★ PCR izvedena tehnologija: potrebno
★ DNK i RNA uzorci: velike razlike, zahtjevni zahtjevi za rad
★ Opasnosti za tijelo: toksični reagensi štete tijelu
Tradicionalna PCR tehnologija i tehnologija derivata imaju preduvjet za odvajanje i prečišćavanje nukleinske kiseline
Svaki biološki uzorak mora proći kroz seriju komplikovane i zamorne obrade uzoraka kako bi se dobili uzorci nukleinske kiseline koji ispunjavaju zahtjeve PCR tehnologije.
Odvajanje i ekstrakcija DNK i RNK oduvijek je bio osnovni zadatak koji relevantni naučni istraživači moraju ponavljati svaki dan.
Zbog velikih razlika između uzoraka, procesi razdvajanja i ekstrakcije DNK i RNK su također vrlo različiti.Ovaj posao zahtijeva visok nivo tehničke stručnosti operatera.Tradicionalne tehnike odvajanja i ekstrakcije zahtijevaju dugotrajan kontakt sa nekim visoko toksičnim hemijskim reagensima.To će uzrokovati nepovratno oštećenje tijela operatera, pa čak i direktnu štetu tokom eksperimenta.
Istovremeno, za one koji imaju veliki broj uzoraka za proučavanje, odvajanje i ekstrakcija nukleinskih kiselina je radno intenzivan zadatak.
Kompleti za izolaciju i ekstrakciju nukleinske kiseline na tržištu su sada zreli i postoji mnogo marki, ali su otprilike isti.Bilo da se radi o centrifugalnom kompletu sa membranskom kolonom od silika gela ili kompletu za metodu magnetnih kuglica, potrebno je mnogo vremena i skupo je.Osim cijene kompleta, postoje i posebni zahtjevi za laboratorijsku opremu.Automatska radna stanica koja se koristi u metodi magnetnih kuglica je vrlo tipična oprema velike vrijednosti, koja predstavlja veliki trošak za laboratorij.
Ukratko
Prije izvođenja PCR eksperimenata, prethodna obrada uzoraka je neizbježna i uvijek glavobolja za istraživače.Kako riješiti ovaj problem i da li se PCR eksperimenti mogu izvoditi bez odvajanja i ekstrakcije nukleinskih kiselina oduvijek je razmišljala većina naučnih istraživača i osoblja kliničkih laboratorija.
Foregene's Solution
Nakon godina mukotrpnog istraživanja Direct PCR tehnologije i srodnih kompleta, Forgene je uspješno probio mnoga uska grla i uspješno postigao direktni PCR za mnoge tipove različitih uzoraka sa jakom otpornošću i prilagodljivošću, omogućavajući istraživačima da se riješe glomaznog i opasnog odvajanja i ekstrakcije nukleinskih kiselina.Ovo će uvelike smanjiti svačiji radni intenzitet, ubrzati proces eksperimenta i uštedjeti troškove znanstvenog istraživanja i testiranja.
Forgeneovo razumijevanje i znanje o DirectPCR-u
Prvo, DirectPCR tehnologija je direktna PCR tehnologija za različite biološke uzorke tkiva.Pod ovim tehničkim uslovima nema potrebe za odvajanjem i ekstrakcijom nukleinskih kiselina, a uzorak tkiva se direktno koristi kao objekat, a ciljni genski prajmeri se dodaju za PCR reakciju.
Drugo, DirectPCR tehnologija nije samo tradicionalna tehnologija amplifikacije DNK šablona, već uključuje i PCR reverzne transkripcije RNA šablona.
Treće, DirectPCR tehnologija ne samo da direktno izvodi rutinske kvalitativne PCR reakcije na uzorcima tkiva, već uključuje i qPCR reakcije u realnom vremenu, što zahtijeva da reakcioni sistem ima snažnu sposobnost da se odupre interferenciji fluorescencije u pozadini i da antagonizira endogene gasitelje fluorescencije.
Četvrto, uzorci tkiva ciljani DirectPCR tehnologijom zahtijevaju samo oslobađanje šablona nukleinskih kiselina i ne uklanjaju proteine, polisaharide, ione soli, itd. koji ometaju PCR reakciju.Ovo zahtijeva da polimeraza nukleinske kiseline i PCR mješavina u reakcionom sistemu imaju odličnu anti-reverzibilnost i prilagodljivost, te mogu osigurati aktivnost enzima i tačnost replikacije u složenim uvjetima.
Peto, uzorci tkiva ciljani DirectPCR tehnologijom nisu bili podvrgnuti nikakvom tretmanu obogaćivanja nukleinskom kiselinom, a količina šablona je veoma mala, što zahteva izuzetno visoku osetljivost i efikasnost amplifikacije reakcionog sistema.
Zaključak
DirectPCR tehnologija je jedan od najvažnijih tehnoloških razvoja i inovacija u proteklih 30 godina od rođenja PCR tehnologije.Forgene je i nastavit će biti pionir i inovator ove tehnologije.
Mogućnosti primjene DirectPCR tehnologije su vrlo široke.Kontinuirano unapređenje i promocija ove tehnologije sigurno će donijeti subverzivne promjene u naučnoistraživačkom i inspekcijskom radu.Ovo je revolucija PCR tehnologije.
Vrijeme objave: Feb-21-2017
