Komplet za izolaciju virusne DNK i RNK Kompleti za pripremu za pročišćavanje ekstrakcije virusne DNK i RNK
Specifikacije
50 priprema, 200 priprema
Komplet za izolaciju ekstrakcije nukleinske kiseline za pročišćavanje virusne RNK koristi spin kolonu i formulu koju je razvio Foregene, koja može efikasno izdvojiti virusnu RNK visoke čistoće i visokog kvaliteta iz uzoraka kao što su plazma, serum, tjelesna tekućina bez ćelija i supernatant ćelijske kulture.Komplet posebno dodaje linearni akrilamid, koji lako može uhvatiti male količine RNK iz uzoraka.RNK-samo kolona može efikasno vezati RNK.Komplet može obraditi veliki broj uzoraka u isto vrijeme.
Cijeli komplet ne sadrži RNKazu, tako da se pročišćena RNK neće razgraditi.Pufer viRW1 i pufer viRW2 mogu osigurati da dobijena virusna nukleinska kiselina ne sadrži proteine, nukleaze ili druge nečistoće, koja se može koristiti direktno za nizvodne eksperimente molekularne biologije.
Komponente kompleta
| Linearni akrilamid |
| Buffer DRL |
| Buffer RW1, Buffer RW2 |
| ddH bez RNaze2O |
| DNK/RNA kolona |
| Instrukcije |
Karakteristike&prednosti
■ Rad na sobnoj temperaturi (15-25℃) tokom cijelog procesa, bez ledene kupke i niskotemperaturnog centrifugiranja.
■ Kompletan komplet bez RNase, nema potrebe da brinete o degradaciji RNK.
■ Visok prinos nukleinske kiseline: Kolona samo za DNK/RNA i jedinstvena formula mogu efikasno pročistiti DNK i RNK.
■ Veliki kapacitet obrade uzoraka: svaki put se može obraditi do 200 μl uzoraka.
■ Velika brzina: jednostavan za rukovanje i može se završiti u roku od 20 minuta.
■ Sigurnost: nije potreban organski reagens.
■ Visok kvalitet: Prečišćeni RNA fragmenti su visoke čistoće, bez proteina i drugih nečistoća, i mogu zadovoljiti različite nizvodne eksperimentalne primjene.
Aplikacija kompleta
Pogodan je za ekstrakciju i prečišćavanje virusne nukleinske kiseline u uzorcima kao što su plazma, serum, telesna tečnost bez ćelija i supernatant ćelijske kulture.
Radni tok
Dijagram
Skladištenje i rok trajanja
■ Ovaj komplet može da se čuva 24 meseca u suvim uslovima na sobnoj temperaturi (15-25℃);ako ga treba čuvati duže vrijeme, može se čuvati na 2–8 ℃.
■ Linearni rastvor akrilamida može se čuvati na sobnoj temperaturi 7 dana;nakon što primite komplet, izvadite ga i čuvajte na -20°C.
■ Nakon dodavanja linearnog akrilamida u pufer DRL, može se čuvati na 2-8°C do 48 sati.Molimo koristite gotova rješenja.
Vodič za analizu problema
Slijedi analiza problema koji se mogu pojaviti prilikom ekstrakcije virusne DNK/RNA, u nadi da će biti od pomoći vašim eksperimentima.Osim toga, za druge eksperimentalne ili tehničke probleme osim uputstava za rad i analize problema, imamo namjensku tehničku podršku koja će vam pomoći.Ukoliko imate bilo kakve potrebe, kontaktirajte nas: 028-83360257 ili na e-mail:
Tech@foregene.com.
Nema ekstrakcije nukleinske kiseline ili mali prinos nukleinske kiseline
Obično postoji mnogo faktora koji utiču na efikasnost oporavka, kao što su: sadržaj nukleinske kiseline u uzorku, način rada, zapremina eluiranja, itd.
Analiza uobičajenih uzroka:
1. Ledeno kupatilo ili centrifugiranje na niskoj temperaturi (4°C) je izvršeno tokom postupka.
Preporuka: Radite na sobnoj temperaturi (15-25°C) tokom cijelog procesa, ne kupajte se u ledenoj kupki i niskotemperaturnom centrifugiranju.
2. Uzorak je nepropisno pohranjen ili je uzorak pohranjen predugo.
Preporuka: Čuvati uzorke na -80°C i izbjegavati ponovno zamrzavanje i odmrzavanje;pokušajte koristiti svježe prikupljene uzorke za ekstrakciju nukleinske kiseline.
3. Nedovoljna liza uzorka.
Preporuka: Uvjerite se da su uzorak i radna otopina za lizu temeljito pomiješani i inkubirani na sobnoj temperaturi (15-25°C) 10 minuta.
4. Nepravilno dodavanje eluenta.
Prijedlog: Uvjerite se da se ddH2O bez RNase dodaje kap po kap u sredinu membrane kolone za prečišćavanje i nemojte ga ispuštati na prsten kolone za prečišćavanje.
5. Tačna zapremina apsolutnog etanola nije dodata puferu RW2.
Prijedlog: Molimo slijedite upute, dodajte tačnu količinu apsolutnog etanola u pufer RW2 i dobro promiješajte prije upotrebe kompleta.
6. Neodgovarajući volumen uzorka.
Preporuka: 200 µl uzorka se obrađuje na svakih 500 µl pufera DRL.Prekomjerna obrada uzorka će rezultirati manjim prinosom ekstrakcije nukleinske kiseline.
7. Neodgovarajući volumen eluiranja ili nepotpuno eluiranje.
Preporuka: Volumen eluenta kolone za prečišćavanje je 30-50μl;ako učinak eluiranja nije zadovoljavajući, preporučuje se produžiti vrijeme na sobnoj temperaturi nakon dodavanja prethodno zagrijanog ddH2O bez RNaze, kao što je 5-10 min.
8. Etanol ostaje na koloni nakon ispiranja puferom RW2.
Preporuka: Ako etanol ostane nakon centrifugiranja s puferom RW2 u trajanju od 2 minute, kolona se može staviti na sobnu temperaturu 5 minuta nakon centrifugiranja kako bi se u potpunosti uklonio preostali etanol.
Pročišćena nukleinska kiselina se razgrađuje
Kvalitet prečišćene nukleinske kiseline povezan je sa očuvanošću uzorka, kontaminacijom RNase, radom i drugim faktorima.Analiza uobičajenih uzroka:
1. Prikupljeni uzorci nisu pohranjeni na vrijeme.
Preporuka: Ako se uzorak ne iskoristi na vrijeme nakon sakupljanja, odmah ga pohranite na -80°C na niskoj temperaturi.Za ekstrakciju RNK pokušajte koristiti svježe sakupljene uzorke.
2. Sakupite uzorke i zamrznite i odmrznite više puta.
Preporuka: Izbegavajte zamrzavanje i odmrzavanje (ne više od jednom) tokom prikupljanja i skladištenja uzoraka, inače će se smanjiti prinos nukleinske kiseline.
3. RNase se uvodi u operacijsku salu ili se ne nose jednokratne rukavice, maske itd.
Preporuka: Eksperimente ekstrakcije RNK najbolje je izvoditi u posebnoj RNA operacijskoj sali, a laboratorijski sto treba očistiti prije eksperimenta.
Nosite jednokratne rukavice i maske tokom eksperimenta kako biste izbjegli degradaciju RNK uzrokovanu uvođenjem RNase u najvećoj mjeri.
4. Reagens je bio kontaminiran RNase tokom upotrebe.
Preporuka: Zamijenite novim kompletom za izolaciju virusne DNK/RNA za povezane eksperimente.
5. Centrifugalne epruvete i vrhovi pipete koji se koriste za manipulaciju RNK kontaminirani su RNKazom.
Prijedlog: Uvjerite se da epruvete za centrifugiranje, vrhovi pipeta, pipete itd. koji se koriste za ekstrakciju RNK ne sadrže RNKazu.
Pročišćena nukleinska kiselina utiče na nizvodne eksperimente
DNK i RNK pročišćeni kolonom za pročišćavanje, ako je sadržaj iona soli i proteina previsok, to će utjecati na nizvodne eksperimente, kao što su: PCR amplifikacija, reverzna transkripcija, itd.
1. Eluirane DNK i RNK imaju zaostale jone soli.
Preporuka: Uverite se da je tačna zapremina apsolutnog etanola dodata u pufer RW2, i operite kolonu za prečišćavanje dva puta brzinom centrifugiranja navedenom u uputstvu za upotrebu;Izvršite centrifugiranje kako biste minimizirali kontaminaciju jonima soli.
2. Eluirane DNK i RNK imaju ostatke etanola.
Prijedlog: Nakon potvrde ispiranja s puferom RW2, izvršite centrifugiranje prazne epruvete pri brzini centrifugiranja u uputama za upotrebu;ako još ima ostataka etanola, možete centrifugirati praznu epruvetu i zatim je staviti na sobnu temperaturu na 5 minuta da biste uklonili ostatke etanola u najvećoj mjeri.
Uputstva za upotrebu:
Priručnik za upotrebu kompleta za izolaciju virusne DNK&RNA
