• facebook
  • linkedin
  • youtube

Patogeni mikroorganizmi su mikroorganizmi koji mogu upasti u ljudsko tijelo, uzrokovati infekcije, pa čak i zarazne bolesti ili patogene.Među patogenima, bakterije i virusi su najopasniji.

Infekcija je jedan od glavnih uzroka morbiditeta i smrti ljudi.Početkom 20. stoljeća, otkriće antimikrobnih lijekova promijenilo je modernu medicinu, dajući ljudima "oružje" za borbu protiv infekcija, a također je omogućilo operaciju, transplantaciju organa i liječenje raka.Međutim, postoje mnoge vrste patogena koji uzrokuju zarazne bolesti, uključujući viruse, bakterije, gljivice i druge mikroorganizme.U cilju poboljšanja dijagnostike i liječenja raznih bolesti, te zaštite zdravlja ljudi

Zdravlje zahtijeva preciznije i brže tehnike kliničkog testiranja.Dakle, koje su tehnologije mikrobiološke detekcije?

01 Tradicionalna metoda detekcije

U procesu tradicionalnog otkrivanja patogenih mikroorganizama, većinu njih potrebno je bojati, kultivisati, te se na osnovu toga vrši biološka identifikacija, kako bi se identifikovale različite vrste mikroorganizama, a vrijednost detekcije je visoka.Tradicionalne metode detekcije uglavnom uključuju mikroskopiju razmaza, kulturu odvajanja i biokemijsku reakciju i kulturu ćelija tkiva.

1 Mikroskopija razmaza

Patogeni mikroorganizmi su male veličine i većina je bezbojna i prozirna.Nakon bojenja, mogu se koristiti za promatranje njihove veličine, oblika, rasporeda itd. uz pomoć mikroskopa.Mikroskopski pregled direktnim bojenjem razmaza je jednostavan i brz, a još uvijek je primjenjiv na one patogene mikrobne infekcije sa posebnim oblicima, kao što su gonokokna infekcija, Mycobacterium tuberculosis, spirohetalna infekcija itd. za ranu preliminarnu dijagnozu.Metoda direktnog fotomikroskopskog pregleda je brža, a može se koristiti za vizuelnu inspekciju patogena sa posebnim oblicima.Ne zahtijeva posebne instrumente i opremu.I dalje je veoma važno sredstvo za detekciju patogenih mikroorganizama u osnovnim laboratorijama.

2 Kultura razdvajanja i biohemijska reakcija

Kultura odvajanja se uglavnom koristi kada postoji mnogo vrsta bakterija i jednu od njih treba odvojiti.Najviše se koristi u sputumu, fecesu, krvi, tjelesnim tekućinama itd. Budući da bakterije rastu i množe se dugo vremena, ova metoda ispitivanja zahtijeva određeno vrijeme., I ne može se obraditi u serijama, tako da je medicinska oblast nastavila da sprovodi istraživanja o tome, koristeći automatizovanu opremu za obuku i identifikaciju kako bi poboljšala tradicionalne metode obuke i poboljšala tačnost detekcije.

3 Kultura ćelija tkiva

Ćelije tkiva uglavnom uključuju klamidiju, viruse i rikecije.Budući da su tipovi ćelija tkiva kod različitih patogena različiti, nakon što se tkiva uklone od patogenih mikroorganizama, žive ćelije se moraju kultivisati subkulturom.Kultivirani patogeni mikroorganizmi se inokuliraju u ćelije tkiva za kultivaciju kako bi se što je više moguće smanjile patološke promjene stanica.Osim toga, u procesu uzgoja ćelija tkiva, patogeni mikroorganizmi se mogu direktno inokulirati kod osjetljivih životinja, a zatim se mogu ispitati karakteristike patogena prema promjenama u tkivima i organima životinja.

02 Tehnologija genetskog testiranja

Uz kontinuirano poboljšanje nivoa medicinske tehnologije u svijetu, razvoj i napredak tehnologije molekularne biološke detekcije, koja može efikasno identificirati patogene mikroorganizme, također može poboljšati trenutni status primjene vanjskih morfoloških i fizioloških karakteristika u tradicionalnom procesu detekcije, te može koristiti jedinstvene gene. Slijed fragmenata identificira tipove patogenih mikroorganizama, tako da je široko polje genetskog testiranja jedinstvena prednost u medicinskom testiranju.

1 Lančana reakcija polimeraze (PCR)

Lančana reakcija polimeraze (Polymerase Chain Reaction, PCR) je tehnika koja koristi poznate oligonukleotidne prajmere za vođenje i pojačavanje male količine genskog fragmenta koji se testira u nepoznatom fragmentu in vitro.Budući da PCR može pojačati gen koji se testira, posebno je pogodan za ranu dijagnozu infekcije patogenom, ali ako prajmeri nisu specifični, može uzrokovati lažno pozitivne rezultate.PCR tehnologija se brzo razvila u proteklih 20 godina, a njena pouzdanost se postepeno poboljšavala od amplifikacije gena do kloniranja i transformacije gena i genetske analize.Ova metoda je ujedno i glavna metoda otkrivanja novog korona virusa u ovoj epidemiji.

Foregene je razvio RT-PCR komplet baziran na Direct PCR tehnologiji, za detekciju normalnih 2 gena, 3 gena i varijanti iz UK, Brazila, Južne Afrike i Indije, loze B.1.1.7 (UK), B.1.351 (ZA), B.1.617 (IND) i P.1 loze (BR), redom.

2 Gene chip tehnologija

Tehnologija genskih čipova odnosi se na upotrebu tehnologije mikromreža za pričvršćivanje fragmenata DNK visoke gustoće na čvrste površine kao što su membrane i stakleni listovi u određenom redoslijedu ili rasporedu putem robotike velike brzine ili sinteze na licu mjesta.Sa DNK sondama označenim izotopima ili fluorescencijom, te uz pomoć principa komplementarne hibridizacije baza, proveden je veliki broj istraživačkih tehnika poput ekspresije gena i praćenja.Primjena tehnologije genskih čipova u dijagnostici patogenih mikroorganizama može značajno skratiti vrijeme dijagnoze.Istovremeno, može otkriti da li patogen ima rezistenciju na lijekove, na koje lijekove su otporni, a na koje su osjetljivi, kako bi se pružile reference za kliničke lijekove.Međutim, cijena proizvodnje ove tehnologije je relativno visoka, a osjetljivost detekcije čipova treba poboljšati.Stoga se ova tehnologija još uvijek koristi u laboratorijskim istraživanjima i nije bila široko korištena u kliničkoj praksi.

3 Tehnologija hibridizacije nukleinskih kiselina

Hibridizacija nukleinske kiseline je proces u kojem se pojedinačni lanci nukleotida s komplementarnim sekvencama u patogenim mikroorganizmima stapaju u stanicama u heteroduplekse.Faktor koji dovodi do hibridizacije je hemijska reakcija između nukleinske kiseline i sondi za identifikaciju patogenih mikroorganizama.Trenutno, tehnike ponovnog ukrštanja nukleinske kiseline koje se koriste za otkrivanje patogenih mikroorganizama uglavnom uključuju hibridizaciju nukleinske kiseline in situ i membransku blot hibridizaciju.Hibridizacija nukleinske kiseline in situ odnosi se na hibridizaciju nukleinskih kiselina u ćelijama patogena sa obilježenim sondama.Membranska blot hibridizacija znači da nakon što eksperimentator odvoji nukleinsku kiselinu ćelije patogena, ona se pročišćava i kombinuje sa čvrstom podlogom, a zatim hibridizuje sa sondom za obračun.Tehnologija obračunske hibridizacije ima prednosti praktičnog i brzog rada, te je pogodna za osjetljive i svrsishodne patogene mikroorganizme.

03 Serološka ispitivanja

Serološkim testiranjem se mogu brzo identificirati patogeni mikroorganizmi.Osnovni princip tehnologije seroloških ispitivanja je otkrivanje patogena putem poznatih patogenih antigena i antitijela.U poređenju sa tradicionalnim odvajanjem ćelija i kulturom, operativni koraci serološkog testiranja su jednostavni.Najčešće korištene metode detekcije uključuju test aglutinacije lateksom i tehnologiju imunoeseja vezanog za enzime.Primjena tehnologije enzimskog imunoeseja može uvelike poboljšati osjetljivost i specifičnost serološkog testiranja.Ne samo da može otkriti antigen u uzorku za testiranje, već i komponentu antitijela.

U septembru 2020., Američko društvo za infektivne bolesti (IDSA) izdalo je smjernice za serološko testiranje za dijagnozu COVID-19.

04 Imunološko testiranje

Imunološka detekcija se naziva i tehnologija imunomagnetne separacije kuglica.Ova tehnologija može odvojiti patogene i nepatogene bakterije u patogenima.Osnovni princip je: upotreba mikrosfera magnetnih kuglica za odvajanje jednog antigena ili više vrsta specifičnih patogena.Antigeni se sastavljaju zajedno, a patogene bakterije se odvajaju od patogena reakcijom tijela antigena i vanjskog magnetnog polja.

Hotspots detekcije patogena - otkrivanje respiratornih patogena

Foregeneov “15 komplet za otkrivanje patogenih bakterija respiratornog sistema” je u razvoju.Komplet može otkriti 15 vrsta patogenih bakterija u sputumu bez potrebe za pročišćavanjem nukleinske kiseline u sputumu.Što se tiče efikasnosti, skraćuje prvobitnih 3 do 5 dana na 1,5 sat.


Vrijeme objave: Jun-20-2021