Uvod:

RNK, naučni naziv ribonukleinska kiselina, njena skraćenica dolazi od RiboNukleinska kiselina, je vrsta nukleinske kiseline koja nastaje povezivanjem najmanje desetina ribonukleotida putem fosfodiestarskih veza.

Pretpostavka istraživanja RNK je ekstrakcija ukupne RNK bez zagađenja, a osnovni princip ekstrakcije RNK može se grubo sažeti na sljedeći način:

1. Prvo poremetite ćelije

2. Zatim uklonite makromolekularne nečistoće (proteini, lipidi, DNK, itd.)

3. Konačno, RNK se taloži uz uklanjanje soli i organskih rastvarača i dalje pročišćavanje RNK

Prošlost i sadašnjost metode ekstrakcije

Prva generacija metode ekstrakcije RNK je TRIzol metoda precipitacije (korišteni reagensi uključuju gvanidin izotiocijanat, fenol, hloroform itd.) koju su osmislili djed po imenu Piotr Chomczynski i baka Nicoletta Sacchi, jer ovaj izum omogućava brzu i laku ekstrakciju RNK, od tada je počelo istraživanje.

Kasnije je djed prodao ovaj patent kompaniji Invitrogen, a Invitrogen je promovirao ovu metodu u svijetu i postao široko korištena metoda.

Kasnije je Invitrogen preuzeo Thermo!

Reprezentativni proizvod: Invitrogenov TRIzol reagens

Međutim, TRIzol metoda precipitacije zahtijeva višestruku precipitaciju i ekstrakciju RNK, a korišteni reagensi su toksični i potrebno im je mnogo vremena da rade.

Stoga je nastala metoda pročišćavanja enzima u koloni druge generacije, koristeći membranu silika gela kao specifičnog materijala za adsorpciju nukleinske kiseline kako bi se maksimizirao oporavak RNK u uzorku uz uklanjanje drugih nečistoća.

Metoda druge generacije pojednostavljuje rad na osnovu stabilnih performansi, smanjuje faktor rizika i poboljšava efikasnost ekstrakcije RNK.

Reprezentativni proizvodi: QIAGEN RNeasy i većina domaćih proizvoda

Međutim, i prva i druga generacija metoda zahtijevaju korištenje DNaze za uklanjanje kontaminacije DNK, što donosi određene neugodnosti naknadnim eksperimentima.Rezidualna DNaza će smanjiti efikasnost reverzne transkripcije i smanjiti sintezu cDNK prvog lanca, čime će uticati na tačnost rezultata.

Stoga je metoda ekstrakcije treće generacije optimizirana na bazi druge generacije.Eksperimentu nije potrebno dodavati enzime, a RNK se lako može dobiti sa samo dvije kolone.

Kolona 1: DNK-čišćenje Kolona za čišćenje DNK

Kolona 2: samo za RNK Kolona specifično adsorbuje i obnavlja RNK

Ovakva jednostavna operacija ne samo da štedi vrijeme, već i olakšava rad nizvodnih eksperimenata!

Reprezentativni proizvodi: QIAGEN RNeasy Plus iForegeneProizvodi serije za prečišćavanje RNK

(RNeasy Plus)

（Foregene'sKomplet za izolaciju ukupne RNK biljaka)

Tiho ti reci!Foregeneov RNA komplet također predstavlja super jednostavan za korištenje RNase Eraser, koji može u potpunosti ukloniti 400 μg RNase na čvrstoj površini za 1 minutu, bez dodavanja bilo kakvih toksičnih tvari u ljudsko tijelo!

Slika1: Tabela poređenja operativnih procesa

Foregene proizvodi mogu završiti ekstrakciju RNK u samo dvije pjesme, ne budite ljubomorni na napredak vašeg eksperimenta!

Slika2:Eeksperimentalni rezultati uporedni grafikon

Prva generacija (1: TRIzol)

Druga generacija (2: RNeasy od QIAGEN-a)

Treća generacija (3: QIAGEN-ov RNeasy plus, 4: Foregene)

Slika3: qPCR graf (grafik krivulje amplifikacije)

Prva generacija (zelena znači TRIzol -, crvena znači TRIzol +)

Druga generacija (nebo plava znači QIAGEN RNeasy-, crvena znači QIAGEN RNeasy +)

Treća generacija (plava znači QIAGEN RNeasy plus, zelena znači Foregene)

(Napomena: qPCR grafikon “-” označava da DNAza nije dodana i DNK kontaminacija nije uklonjena. Stoga je CT veći i rezultat nije tačan; “+” označava da je DNaza dodana i da je kontaminacija DNK uklonjena, rezultat je tačan)

Svaka tehnička nadogradnja znači da se rad eksperimenta razvija u jednostavnijem i korisnijem smjeru.

Foregene ima za cilj da pomogne većem broju naučnih istraživača da uštede eksperimentalno vreme i troškove, dobiju visokokvalitetne eksperimentalne rezultate i zajednički stvore vrednija naučno-istraživačka dostignuća.